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二氧化碳培養(yǎng)箱 我有新說(shuō)法
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二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)飽和濕度(95%),來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。

1基本信息

應(yīng)用范圍

其廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。

用戶的要求

用戶對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條基本的要求:

一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟取⒍趸紳舛群蜐穸忍峁┓€(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進(jìn)展;

二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進(jìn)行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護(hù)研究成果,防止樣品損失。

2微處理控制系統(tǒng)

微處理控制系統(tǒng)是維持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2 濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統(tǒng)。微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件(如高低溫自動(dòng)調(diào)節(jié)和警報(bào)裝置、CO2警報(bào)裝置、密碼保護(hù)設(shè)置等)的運(yùn)用,使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡(jiǎn)便。

如:LEEC 的PID 微處理器觸摸屏控制系統(tǒng),它能嚴(yán)格控制氣體的濃度并將其損耗降低水平,以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變,且能保證長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)程中箱內(nèi)溫度,并有液晶顯示,圖形化過(guò)程監(jiān)控、干預(yù)事件記錄等。此外報(bào)警系統(tǒng)也是不可少,它能讓你及時(shí)知道培養(yǎng)箱出現(xiàn)的情況,并做出反應(yīng),從而大限度地降低了損失,保證實(shí)驗(yàn)的連續(xù)性。有些培養(yǎng)箱有聲/光報(bào)警裝置,溫度變化達(dá)±0.5℃,或CO2 濃度變化達(dá)±5%時(shí),即會(huì)自動(dòng)報(bào)警;有些具有CO2 濃度異常報(bào)警顯示功能;有些具有低壓、斷電報(bào)警功能。這些裝置都是為了方便使用者,以減少繁瑣枯燥的實(shí)驗(yàn)過(guò)程而設(shè)計(jì)的。

3加熱方式

氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱系統(tǒng)都是和可靠的,但是它們都有著各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。

水套式加熱

水套式加熱是通過(guò)一個(gè)獨(dú)立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來(lái)維持溫度恒定的,其優(yōu)點(diǎn):水是一種很好的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時(shí)候,水套式系統(tǒng)就可以比較長(zhǎng)時(shí)間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,有利于實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制或經(jīng)常停電)的用戶選用。

氣套式加熱

氣套式加熱是通過(guò)遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對(duì)內(nèi)箱體進(jìn)行加熱的,又叫六面直接加熱。

氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn),特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開(kāi)關(guān)取放樣的培養(yǎng)。此外,對(duì)于使用者來(lái)說(shuō)氣套式設(shè)計(jì)比水套式更簡(jiǎn)單化(水套式需要對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,還有潛在的污染隱患)。

4二氧化碳濃度控制

二氧化碳濃度可以通過(guò)紅外傳感器(IR)或熱導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行測(cè)量。兩種傳感器各有優(yōu)缺點(diǎn)。

熱導(dǎo)傳感器

熱導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對(duì)內(nèi)腔空氣熱導(dǎo)率的連續(xù)測(cè)量,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會(huì)使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)生變化,這樣就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)與CO2濃度直接成正比的電信號(hào)。

TC控制系統(tǒng)的一個(gè)缺點(diǎn)就是箱內(nèi)溫度和相對(duì)濕度的改變會(huì)影響傳感器的度。當(dāng)箱門被頻繁打開(kāi)時(shí),不僅CO2濃度,溫度和相對(duì)濕度也會(huì)發(fā)生很大的波動(dòng),因而影響了TC傳感器的精度。當(dāng)需要的培養(yǎng)條件和頻繁開(kāi)啟培養(yǎng)箱門時(shí),此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。

紅外傳感器

紅外傳感器(IR)它是通過(guò)一個(gè)光學(xué)傳感器來(lái)檢測(cè)CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個(gè)紅外發(fā)射器和一個(gè)傳感器,當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測(cè)出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對(duì)應(yīng)于箱體內(nèi)CO2的水平,從而可以得出箱體內(nèi)CO2的濃度。由于IR系統(tǒng)是通過(guò)紅外線減少來(lái)確定箱內(nèi)CO2濃度,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR系統(tǒng)對(duì)箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感,IR傳感器應(yīng)用在進(jìn)氣口具有HEPA空氣過(guò)濾器的培養(yǎng)箱較合適。

5相對(duì)濕度

箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開(kāi)關(guān)門后)才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。

目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對(duì)濕度水平可達(dá)95%左右,但開(kāi)門后濕度恢復(fù)速度很慢)。盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱,因?yàn)闈穸日舭l(fā)面積越大,越容易達(dá)到大相對(duì)飽和濕度并且開(kāi)關(guān)門后的濕度恢復(fù)的時(shí)間越短。

6污染物的控制

污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面,并結(jié)合自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。

例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過(guò)程中有時(shí)會(huì)伴有霉菌生長(zhǎng),為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些公司開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)了帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱;還有公司設(shè)計(jì)HEPA濾器能過(guò)濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過(guò)濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,自動(dòng)高溫?zé)峥諝鈿⒕b置能使箱內(nèi)溫度達(dá)到高溫(如200℃)從而殺死所有污染微生物,甚至芽孢等耐高溫微生物,這些裝置對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)是更有安全保障的。

7使用注意事項(xiàng)

1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),否則會(huì)損壞加熱元件。

2、培養(yǎng)箱運(yùn)行數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少,當(dāng)?shù)退恢甘緹簦╓Low12)亮?xí)r應(yīng)補(bǔ)充加水。先打開(kāi)溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔補(bǔ)充加水使低水位指示燈熄滅,再計(jì)量補(bǔ)充加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后堵塞溢水孔。

3、二氧化碳培養(yǎng)箱可以做高精度恒溫培養(yǎng)箱使用,這時(shí)須關(guān)閉CO2控制系統(tǒng)。

4、因?yàn)镃O2傳感器是在飽和濕度下校正的,因此加濕盤必須時(shí)刻裝有滅菌水。

5、當(dāng)顯示溫度超過(guò)置定溫度1℃時(shí),超溫報(bào)警指示燈(OverTemp7)亮,并發(fā)出尖銳報(bào)警聲,這時(shí)應(yīng)關(guān)閉電源30分鐘;若再打開(kāi)電源(溫控)開(kāi)關(guān)(Power20)仍然超溫,則應(yīng)關(guān)閉電源并報(bào)維修人員。

6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時(shí)應(yīng)更換鋼瓶。

7、盡量減少打開(kāi)玻璃門的時(shí)間。

8、如果二氧化碳培養(yǎng)箱長(zhǎng)時(shí)間不用,關(guān)閉前必須清除工作室內(nèi)水分,打開(kāi)玻璃門通風(fēng)24小時(shí)后再關(guān)閉。

9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱工作室時(shí),不要碰撞傳感器和攪拌電機(jī)風(fēng)輪等部件。

10、拆裝工作室內(nèi)支架護(hù)罩,必須使用隨機(jī)專用扳手,不得過(guò)度用力。

11、搬運(yùn)培養(yǎng)箱前必須排除箱體內(nèi)的水。排水時(shí),將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,輕輕吸一口,放下水管,水即虹吸流出。

12、搬運(yùn)二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出工作室內(nèi)的擱板和加濕盤,防止碰撞損壞玻璃門。

13、搬運(yùn)培養(yǎng)箱時(shí)不能倒置,同時(shí)一定不要抬箱門,以免門受損。

參考資料

參考資料編輯區(qū)域


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