食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 貝類中失憶性貝類毒素的測(cè)定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貝類中失憶性貝類毒素測(cè)定的酶聯(lián)免疫吸附法、液相色譜法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì) 譜法。 本標(biāo)準(zhǔn)中酶聯(lián)免疫吸附法適用于貝類及其制品中失憶性貝類毒素的測(cè)定,液相色譜法和液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法適用于貝類及其制品(不包括鹽漬制品)中失憶性貝類毒素軟骨藻酸(DA)的測(cè)定。 酶聯(lián)免疫吸附法 2 原理 本方法測(cè)定基礎(chǔ)是競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫反應(yīng),酶標(biāo)板上包被有針對(duì)軟骨藻酸抗體的捕捉抗體,加入抗軟 骨藻酸抗體、標(biāo)準(zhǔn)液或樣品溶液及軟骨藻酸酶標(biāo)記物,游離的失憶性貝類毒素與軟骨藻酸酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng) 軟骨藻酸抗體,同時(shí)軟骨藻酸抗體與捕捉抗體連接。沒有結(jié)合的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被除去。將酶 基質(zhì)和顯色劑加入到微孔中并且孵育。結(jié)合的酶標(biāo)記物將無(wú)色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng) 終止液后使顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm 測(cè)量微孔溶液的吸光度值,試樣中失憶性貝類毒素的含 量與吸光度值成反比,按繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線定量計(jì)算。 3 試劑和材料 除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為 GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。