復方仙靈脾注射液是由淫羊藿、黃芪等中藥材組成，臨床上用于治療中風后遺癥。黃芪甲苷為黃芪的主要有效成分。曾有報道用紫外分光光度法、薄層掃描法和液相色譜法測定淫羊藿制劑中黃芪甲苷的含量，但復方仙靈脾注射液中黃芪甲苷含量的測定方法筆者尚未見報道。本實驗采用薄層掃描法對復方仙靈脾注射液中黃芪甲苷進行了含量測定，該方法較好地排除了制劑中其他成分的干擾，具有簡便、快速、準確等特點，為控制該制劑的內在質量提供了可靠的依據。
1 儀器與試劑
CS-9301型雙波長薄層掃描儀（島津）；硅膠G（青島海洋化工廠）；D101大孔吸附樹脂（天津制膠廠）；復方仙靈脾注射液（河南中醫(yī)學院一附院制劑室）；黃芪甲苷對照品（中國藥品生物制品檢定所）；所用試劑均為分析純。
2 實驗方法與結果
2．1 對照品溶液的制備
精密稱取干燥恒重的黃芪甲苷對照品1.98mg，置2mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，濃度為0.99mg/mL。
2．2 供試品溶液的制備
用移液管精密吸取復方仙靈脾注射液5mL，置分液漏斗中，先用0.1mol/L NaOH飽和過的正丁醇萃取3次（10，15，20mL），將正丁醇層用正丁醇飽和過的0.1mol/L NaOH溶液洗滌3次（15，20，20mL），棄去堿液，正丁醇層置水浴上蒸干，殘渣以水7mL溶解，置于已處理好的大孔吸附樹脂柱上，依次用蒸餾水、40％乙醇、50％乙醇適量進行洗脫。收集50％乙醇洗脫液，蒸干，用少量甲醇溶解，移至5mL量瓶中，用甲醇定容至刻度。
2．3 陰性對照液的制備
按處方比例稱取除黃芪以外其他藥材，按照復方仙靈脾注射液的工藝進行制備，得陰性對照樣品，吸取陰性對照樣品5mL，按“2．2”項下方法，得陰性對照液。
2．4 薄層色譜條件
吸附劑：硅膠G-0．5％CMC-Na（3：1）攪拌均勻后，涂布于（10cm×20cm）玻璃板上，厚度為0.5mm，晾干后于105℃活化1h，置干燥器中備用。展開劑：氯仿．甲醇-水（13：7：2）下層液。展開方式為上行，展距為10cm（展開前先飽和30min）。展開后取出薄層板，晾干，以10％硫酸乙醇溶液為顯色劑進行顯色，于105℃烘至斑點清晰。紫外365nm定位。
2．5 薄層掃描條件
采用反射法單波長鋸齒掃描法，狹縫為1.2mm×1.2mm，線性參數SX=3，掃描寬度為14mm，靈敏度為中等，掃描波長為λs=500nm，λR=700nm。
2．6 線性范圍
分別吸取上述對照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10.00μL，點于同一硅膠G薄層板上，按“2．5”項下的方法進行掃描測定。以斑點峰面積積分值為縱坐標，以黃芪甲苷對照品點樣量為橫坐標作圖，得一不通過原點的直線，其回歸方程式為：Y=151.32X+81.38，相關系數r=0.9998。結果表明，黃芪甲苷對照品點樣量在1.98～9.90μg 之間，與其峰面積值呈線性關系。
2．7 陰性對照實驗
在供試品的色譜中，與黃芪甲苷對照品色譜的相應位置上，顯相同的桔黃色熒光斑點，在陰性對照液的相應位置上，無此斑點。
2．8 穩(wěn)定性實驗
在同一薄層板上，點對照品溶液4μL，薄層色譜后，分別于30，60，90，120 min時進行掃描測定，斑點峰面積積分值分別為1265.35，1240.58，1237.79，1232.23。結果表明，在2h內斑點穩(wěn)定，RSD為1．18％。
2．9 精密度實驗
吸取供試品溶液4μL，點相同濃度的5個點于同一薄層板上，斑點峰面積積分值的平均值為1 327.61，RSD為1.60％。
2．10 重復性實驗
吸取供試品溶液10μL，對照品溶液4μL，分別點于同一薄層板上，進行掃描測定，再同法測定4次，復方仙靈脾注射液中黃芪甲苷的含量（mg/mL）分別為0.052，0.052，0.050，0.051，0.049，平均值為0.051mg/mL，RSD為2.57％。
2．11 回收率實驗
精密量取復方仙靈脾注射液5mL，加入0.5mg的對照品，進行掃描測定，計算回收率，平均回收率為99.44％，RSD
為1.48％，n=5
2．12 供試品的含量測定
精密吸取供試品溶液10μL，對照品溶液2，4μL，交叉點樣于同一薄層板上，進行掃描測定。
3 討論
3．1 由實驗結果可知，在處理樣品時，用水、40％乙醇、50％乙醇從大孔吸附樹脂色譜柱中洗脫，并取50％乙醇的洗脫液，可以排除制劑中其他成分的干擾。
3．2 通過將薄層板橫放點樣，并且在展開前預飽和30min，不僅能避免邊緣效應對薄層色譜圖譜的不良影響，還會使斑點更集中。
3．3 實驗表明，采用薄層掃描法測定復方仙靈脾注射液中黃芪甲苷的含量，操作較為簡單，重現(xiàn)性好，靈敏可靠，可以作為控制該制劑質量的依據之一。
參考文獻
[1] 蘇健，王寶琴，王廣才，等．歸其合劑及其主藥黃芪的檢驗方法研究[J]．中國中藥雜志，1994，19（3）：158．
[2] 王京輝，張小茜，周富榮，等．薄層掃描法測定芪蓉潤腸合劑中黃芪甲甙的含量[J]．中國中藥雜志，1997，22（7）：418．