石楠葉有祛風(fēng)、通絡(luò)、益腎之功效。其中的兩種有效成分齊墩果酸和熊果酸在抗炎、保肝、止疼、強(qiáng)心等許多療效方面已被現(xiàn)代科學(xué)證實(shí)。目前石楠葉中熊果酸的測(cè)定方法有薄層色譜法。本實(shí)驗(yàn)采用毛細(xì)管電泳法測(cè)得了石楠葉中齊墩果酸和熊果酸異構(gòu)體的含量
1 實(shí)驗(yàn)部分
儀器與藥品：美國(guó)Waters Quanta 4000E毛細(xì)管電泳儀。毛細(xì)管（河北永年光導(dǎo)纖維廠，直徑75μm）總長(zhǎng)60cm，有效長(zhǎng)度52cm。數(shù)據(jù)處理由Waters Millennium 2010色譜管理軟件完成。Na2HPO4，Na2B4O7，SDS，95%乙醇均為分析純。齊墩果酸和熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。石楠葉購(gòu)于河北保定市藥材公司。水為雙蒸餾水。
2 方法與結(jié)果
2．1 實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)前，毛細(xì)管依次用0.1mol／L鉻酸、重蒸餾水、0.1mol／L KOH、重蒸餾水各沖洗5min，然后再用緩沖溶液沖洗4min。在每?jī)纱芜\(yùn)行之間，毛細(xì)管僅用緩沖溶液沖洗4min。3次運(yùn)行后，毛細(xì)管需用上面方法清洗一回。運(yùn)行電壓為16kV，214nm 紫外檢測(cè)，重力進(jìn)樣時(shí)間為5s，實(shí)驗(yàn)溫度是26℃。實(shí)驗(yàn)前緩沖溶液用微濾膜過(guò)濾。
2．2 優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件：綜臺(tái)考察緩沖溶液組份濃度，SDS濃度及有機(jī)溶劑（乙醇）含量對(duì)齊墩果酸和熊果酸標(biāo)準(zhǔn)混合物分離的影響。確定了*的緩沖溶液體系為15mmo|／L Na2HPO4、15mmol／Lna2B4O7、10mmol／L SDS、5 %乙醇的電解質(zhì)溶液。在此條件下，齊墩果酸和熊果酸譜峰能*分開，分離度達(dá)到0.98。
2．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：稱取適量的齊墩果酸和熊果酸對(duì)照品，分別溶于一定量乙醇中得標(biāo)準(zhǔn)溶液以此標(biāo)準(zhǔn)溶液為基礎(chǔ)再配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，在*分離條件下進(jìn)行測(cè)定。以譜圖中峰面積校正值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。兩種物質(zhì)的線性回歸方程（校正峰面積mV／s，濃度g／mL）和相關(guān)系數(shù)（r）及線性范圍為：
齊墩果酸Y=一28.5+13.4×10000（r=0.997）線性范圍為0.53～3.56mg/mL。
熊果酸Y=一14.8+16.9×10000X（r=0.996）線性范圍為0.57～4.12mg／mL。
2．4 樣品測(cè)定：稱取3.94 g石楠葉碎塊，放人索氏提取器中，用80mL 95%乙醇提取1、5h，將提取液濃縮并定容至50mL得樣品溶液。在*分離條件下運(yùn)行樣品溶液，測(cè)得石楠葉中齊墩果酸含量（g／g）為2.79％，RSD=2.67%（n=5）；熊果酸含量（g／g）為7.98%，RSD=2.44%（n=5）。
2．5 回收率測(cè)定：加樣回收率測(cè)定結(jié)果，齊墩果酸為102%，RSD=2.85% （ =4）；熊果酸為104％，RSD= 3.21% （n=4）。
3 討論
毛細(xì)管電泳法測(cè)定石楠葉中齊墩果酸和熊果酸的含量具有快速、準(zhǔn)確、微量?jī)?yōu)點(diǎn)。其中齊墩果酸含量為給出。此法測(cè)得的熊果酸含量高于其它方法測(cè)定值，說(shuō)明用乙醇提取效率好于甲醇。本文提供了評(píng)價(jià)石楠葉藥材及相關(guān)藥物質(zhì)量的一種可靠分析手段。
參考文獻(xiàn)：
[1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院縮．中藥大辭典[M]．上冊(cè)．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1997