摘要：目的：建立測(cè)定護(hù)腎痛風(fēng)泰顆粒中熊果酸含量的方法。方法：采用鋸齒形反射雙波長(zhǎng)薄層掃描法對(duì)熊果酸進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：熊果酸在1～5μg內(nèi)線性關(guān)系良好?；厥章?9.83％，RSD為0.41％。理論：此方法準(zhǔn)確，靈敏度高。可作為該制劑控制熊果酸含量的方法。
關(guān)鍵詞：護(hù)腎痛風(fēng)泰顆粒；薄層掃描法；山茱萸；熊果酸
護(hù)腎痛風(fēng)泰顆粒是我院療效較確切的科研制劑，由秦艽、獨(dú)活、防風(fēng)、赤芍、山茱萸、威靈仙、葛根、牛膝、地龍等15種藥組成。其中的山茱萸由于市場(chǎng)上偽品較多，而此藥又較貴。故擬建立此藥含量測(cè)定方法，對(duì)該制劑質(zhì)量進(jìn)行控制。保證藥品臨床療效。
1 儀器與藥品
CS-9301型雙波長(zhǎng)薄層掃描儀（日本島津），定量毛細(xì)管（美國(guó)），939型薄層自動(dòng)制板器（重慶南岸貝爾德儀器技術(shù)廠），超聲波振蕩器（HKD1002VS），三用紫外光燈（ZF-2）。熊果酸對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）。硅膠G、GF254（青島海洋化工廠），試劑均為分析純。護(hù)腎痛風(fēng)泰顆粒（本院制劑室提供）。
2 熊果酸含量測(cè)定
掃描條件選擇 鋸齒形反射法雙波長(zhǎng)掃描，λs=520nm，λR=700nm，靈敏度：中等，狹縫1.20mm×1.20mm。線性參數(shù)XS=3。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取熊果酸對(duì)照品0.5003g，于lml容量瓶中，加無(wú)水乙醇使溶解后稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)已烷-氯仿-醋酸乙酯（20：5：8）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1O％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱2～5min，至呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)集中，無(wú)干擾。在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，測(cè)定各斑點(diǎn)的吸收度值。得回歸方程為Y=18168X+5589，r=0.9989，點(diǎn)樣量在1～5μg內(nèi)線性關(guān)系良好。
穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液4μl，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法操作，顯色后每隔10min連續(xù)掃描2次，取1h內(nèi)測(cè)定結(jié)果，RSD=1.2％（n=14），結(jié)果表明，斑點(diǎn)面積積分值在1h內(nèi)不變。
精密度試驗(yàn) 在同一薄層板上精密點(diǎn)相同量的對(duì)照品溶液5個(gè)點(diǎn)，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法操作，測(cè)定，RSD為1.81％，表明精密度符合薄層掃描的要求。
樣品的含量測(cè)定 取本品約10g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚適量．加熱回流提取4h，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)檬兔眩?O～6O℃）浸泡2次，每次15ml（約浸泡2min），傾去石油醚，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇-氯仿（3：2）混合液微熱使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中。并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。．按照薄層色譜法。吸取供試品溶液5μl，對(duì)照品溶液2μl、4μl，分別交叉點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)乙烷-氯仿-醋酸乙酯（20：5：8）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1O％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱2～5min，至呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)集中，無(wú)干擾。用外標(biāo)二點(diǎn)法。按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作方法測(cè)定。得測(cè)定結(jié)果。
由表可見(jiàn)6批樣品熊果酸平均含量為0.0366％，樣品的RSD為1.35％。由于藥材的原因。熊果酸的含量有所不同，故確定本品熊果酸含量應(yīng)不低于0.0358％。
樣品回收率試驗(yàn) 取已知含量的供試品溶液6份，準(zhǔn)確加入熊果酸對(duì)照品，按供試品制備和薄層掃描方法測(cè)定回收率99.83％，RSD=0.41％。6批樣品的含量范圍為0.0358％～0.0372％。
3 討論
羧甲基纖維素鈉硅膠G板厚0.3—0.4mm，由于加入粘合劑，又是用硫酸顯色，故ll0"C時(shí)易熏黑，干擾結(jié)果，操作時(shí)加熱時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。
硅膠板活化后要放入干燥器內(nèi)1～2h后再用，切不可活化后馬上用，易造成展開后的斑點(diǎn)抒散成指印形，或Rf值不一致，掃描時(shí)掃進(jìn)雜質(zhì)，結(jié)果不準(zhǔn)。展距以15cm為好，晾干30min以上。