[摘要]目的:建立康胃泰膠囊中黃芪甲苷的含量測定方法,為控制康胃泰膠囊的質量提供依據。方法:樣品經薄層層析、15%硫酸乙醇溶液顯色后,λs=520nm,λ R=680nm波長處掃描測定。結果:樣品的平均回收率為98.27%,RSD=2.41。結論:本法可作為康胃泰膠囊中黃芪甲苷的定量方法。
[關鍵詞]黃芪甲苷;康胃泰;薄層掃描
慢性胃炎是一種常見病,其發(fā)病率在符種胃病中居*。隨著經濟的發(fā)展,生活節(jié)湊的提高,慢性胃炎的發(fā)病率逐年增高。我院自行研制的康胃泰膠囊經過臨床多年使用,治療慢性胃炎*,本研究用薄層色譜法對康胃泰膠囊中的黃芪甲苷進行定量,為康胃泰膠囊的質量控制提供了可靠的依據。
1 儀器與試藥
CS-9000型薄層掃描儀(島津),定量毛細管(美國DRUMMOND公司),硅膠GF254預制板(青島海洋化工廠),F(xiàn)A1004電子天平(上海天平儀器廠),中藥材購自哈爾濱市醫(yī)藥公司,康胃泰膠囊由本院制劑室提供,所用試劑均為AR級。
2 方法與結果
2.1 溶液的制備
2.1.1 供試品溶液的制備 精稱供試品粉末10g,置帶塞三角瓶中,加甲醇80ml,超聲提取30min,過濾,殘渣分兩次各加甲醇40m1分別超聲提取15min,合并提取液,州收甲醇,殘留物加水約35ml,用水飽和的正丁醇蘋取5次,每次30ml,合并正丁醇萃取液,用0.1mo1/L的氫氧化鈉溶液提取3次,每次50ml,棄掉堿液,用飽和正丁醇的水液提取2次,每次50ml,棄掉水液,減壓I山收正丁醇至盡,殘留物加水lOm1分次溶解,通過D1O1型大孔樹脂柱(1.5cmX 12cm,上部加中性氧化鋁2.5g),用水50ml沈脫,介掉水液,再用15%乙醇50ml洗脫,棄掉該洗脫液,繼用70%乙醇60ml洗脫,并收集70%乙醇洗脫液,蒸干后,殘留物用甲醇溶解,并定容于5ml量瓶中,稀釋到刻度,搖勻,作為供試品溶液 。
2.1.2 對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品,加甲醇制成lmg/ml的溶液,作為對照品溶液。
2.1.3 空白樣品溶液的制備 按康胃泰膠囊的處方和制備工藝,制備僅缺黃芪的藥材陰性對照品,作為空白樣品溶液。
2.2 薄層色譜和掃描條件
吸取上述供試品溶液、對照品及空白樣品溶液各2μ1分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇-水(13:7:2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以15硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,日光下顯相同的棕褐色斑點,空白對照無此斑點。
黃芪甲什薄層色譜斑點經掃描在52Onm處有zui大吸收峰,在650nm處無吸收。故選用雙波長反射法鋸齒掃描。 λλs=520nm。ΛR=680nm,狹縫1.25nmX 1.25nm,靈敏度:中。
2.3 線性關系考察 精密吸取對照品溶液(1mg/ml)2,4,6,8,lOμl分別點于同一薄層板上,按試驗條件展開,顯色,掃描測定,測其峰面積。以點樣zui對色譜峰面積進行回歸,結果表明,黃芪甲苷在2.0~10.0線性關系良好,其回歸方程為:Y=576.48X4585.36 r=O.9993(n=5)
2.4 回收率試驗 精密稱取已知含量的同一批號樣品,分別粘密加入一定量黃芪甲苷對照品,按上述方法進行測定。
2.5 樣品測定 取三批樣品,同法測定樣品中的黃芪甲苷的含量。
2.6 穩(wěn)定性試驗將樣品三批,在37℃~40℃、相對濕度過75%的條件下保存,每lmo考察1次,連續(xù)3mo,結果本品性狀、鑒別、相對密度、衛(wèi)生學檢查及含量測定均符合規(guī)定。
3 討論
本試驗用雙波長薄層掃描法測定康胃泰膠囊中黃芪甲苷的含蹙,方法簡單穩(wěn)定,重現(xiàn)性好,浸板顯色均勻,靈敏度高,可有效地控制康胃泰膠囊的質量。
參考文獻
[1] 王宇,于超,付善全,等. 薄層掃描法測定衡生顆粒中黃芪甲苷的含量[J].中國中藥雜志.2001,26
(10):7l7