中藥多糖的提取、分離純化及分析方法的進(jìn)展

1  中藥多糖的提取

1.1　傳統(tǒng)提取方法

　 中藥多糖常規(guī)的提取方法多采用熱水、酸、堿、乙醇等溶劑進(jìn)行浸提，如水提醇沉法、酸堿提取法、索氏提取法等作為經(jīng)典的傳統(tǒng)提取工藝，在中草藥有效成分的提取過程中應(yīng)用廣泛。

2　中藥多糖的分離

2.1  除蛋白質(zhì)

2.1.1　 Sevag法

　 利用蛋白質(zhì)在三氯乙烷等有機(jī)溶劑中變性的特點，將提取液與Sevag試劑（氯仿:戊醇或正丁醇以4:1或5:1比例混合）按一定比例混合，通過離心除去介于提取液與Sevag試劑交界處的變性蛋白質(zhì)。夏泉等利用Sevag法除去黃芪粗多糖中的蛋白質(zhì)成分，經(jīng)6次處理后，黃芪粗多糖凍干粉中的蛋白質(zhì)含量下降70.8%，而多糖的含量僅下降4.44%。

3.1.3　 金屬絡(luò)合物法

　 作為沉淀劑沉淀法中的一種，其基本原理是溶度積規(guī)律，根據(jù)多糖能與銅、鋇、鈣、鉛離子形成難溶性的絡(luò)合物沉淀，從溶液中沉淀析出的方法。得到的絡(luò)合物沉淀用5%無機(jī)酸乙醇溶液或硫化氫分解。

3.1.4　 鹽析法

　 根據(jù)不同多糖在不同鹽濃度中溶解度不同，在中藥水提溶液加無機(jī)鹽（常用的鹽析劑有硫酸銨、氯化鈉、氯化鉀等，以硫酸銨*）至一定濃度或達(dá)到飽和時，可使有些物質(zhì)溶解度降低，甚至沉淀析出，達(dá)到與水溶性雜質(zhì)分離的目的。

　 親和層析（AE）是根據(jù)生物大分子與某些對應(yīng)的專一分子特異性的、可逆性的親和結(jié)合作用而建立的一種層析技術(shù)。

　 江詠等通過靜態(tài)吸附的方法對巴戟天粗多糖在Con A Sephorose 4B親和填料上的吸附和脫附情況進(jìn)行研究，確定其*吸附條件為：pH7.5，NaCl濃度0.1 mol/L；*脫附條件為：pH6.5，α-D-甲基葡萄糖苷濃度0.02 mol/L。在此條件下，巴戟天粗多糖被分離為MOP-A1和MOP-A2兩個組分，占進(jìn)樣總糖量的44.8％。

3.2.2無菌制劑設(shè)備（非zui終滅菌的注射劑）

　　無菌粉針、水針生產(chǎn)線設(shè)備；混粉、篩粉機(jī)，燈檢機(jī)；凍干機(jī)，配料、過濾設(shè)備等

3.2.3無菌制劑設(shè)備（可zui終滅菌的注射劑）干

　　濃配罐、稀配罐及其輸送系統(tǒng)；洗、烘、灌、封機(jī)組及包裝機(jī)；滅菌柜，燈檢機(jī)，包裝機(jī)等。

3.2.4液體眼用制劑設(shè)備

　　配液罐及輸送系統(tǒng)；過濾器、滅菌柜、灌裝機(jī)；燈檢機(jī)，包裝設(shè)備等。

3.2.5固體口服制劑設(shè)備

　　粉碎、混合、制粒、整粒、干燥設(shè)備；壓片、充填、包衣設(shè)備；軟膠囊制備生產(chǎn)線；干燥、篩選、滅菌、內(nèi)包裝設(shè)備等。

3.2.6液體口服制劑設(shè)備

　　配料、滅菌、過濾設(shè)備；洗瓶、灌裝、封口設(shè)備；內(nèi)包裝設(shè)備等。

3.2.7生物制品與血液制品設(shè)備

　　配制及物料輸送系統(tǒng)；生物反應(yīng)器（發(fā)酵罐、培養(yǎng)罐）；分離、純化設(shè)備，離心、膜分離設(shè)備；灌裝機(jī)，凍干機(jī)，軋蓋機(jī)等。

3.2.8中藥制劑設(shè)備

　　提取、濃縮系統(tǒng)，粉碎、滅菌設(shè)備；篩選設(shè)備，干燥混合設(shè)備；藥丸制備設(shè)備，片劑、膠囊、顆粒劑制備設(shè)備。

 

4.2.3 二項主要審核內(nèi)容

　　（1）審核供應(yīng)商的技術(shù)條件與制造能力，審核FAT、SAT、驗收測試報告；

　　（2）審核設(shè)備、工程系統(tǒng)的DQ、IQ、OQ、PQ文件。

4.2.4 質(zhì)量*人的一票否決權(quán)

　　行使否決權(quán)的條件。若供應(yīng)商的設(shè)備有下列條件情況發(fā)生時即可對其否決：

　　（1）不符合新版GMP規(guī)范；

　　（2）不能滿足生產(chǎn)工藝的要求；

　　（3）對藥品會產(chǎn)生或可能產(chǎn)生污染的設(shè)備；

　　（4）結(jié)構(gòu)設(shè)計不合理，不能方便地驗證，關(guān)鍵工藝參數(shù)不能顯示或自動記錄的設(shè)備；

　　（5）不符合安全要求及其它國家規(guī)范的設(shè)備；

　　（6）在市場上屬于技術(shù)落后或淘汰設(shè)備；

　　（7）能耗大，污染環(huán)境的設(shè)備。

　　做到符合用戶產(chǎn)能要求并留有余地，安全到位不逾矩、不違規(guī)。只有做好這些工作才能稱得上一家合格的符合新版GMP規(guī)范要求的設(shè)備制造企業(yè)。