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酵母培養(yǎng)基的配制

來源:   2007年02月02日 11:07  
一、目的要求 
    了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。 
學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。 
二、基本原理 
    麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基,馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基,而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。 
三、實驗材料 
(一)藥品 
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,F(xiàn)eS04、瓊脂。 
(二)儀器 
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。 
(三)玻璃器皿 
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。 
(四)其他物品 
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。 
四、實驗內(nèi)容 
(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制 
1.培養(yǎng)基成分 
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。 
2.配制方法 
    (1)用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發(fā)芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發(fā)芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存?zhèn)溆谩?nbsp;
    (2)取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化*(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍(lán)色出現(xiàn),即表示糖化*)。 
    (3) 糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20 m1,調(diào)勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。 
   (4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調(diào)pH至6.4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S,可用未經(jīng)發(fā)酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。 
    (5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補(bǔ)充失水。 
    (6)分裝、加塞、包扎。 
    (7)高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 
(二)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制 
1、培養(yǎng)基成分 
馬鈴薯                                             20g 
葡萄糖                                             2 g 
瓊脂                                               1.5-2g 
水                                                 100ml 
自然pH                                              
    2.配制方法 
    (1)配制20%馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000m1。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存?zhèn)溆谩?nbsp;
(2)配制時,按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。 
    (3)分裝、加塞、包扎。 
    (4)高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 
  (三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制 
1.培養(yǎng)基成分 
黃豆芽                                             10g 
葡萄糖                                             5g 
瓊脂                                               1.5-2g 
水                                                 100ml 
自然pH                                               
    2.配制方法 
    (1)稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補(bǔ)足失水,即制成10%豆芽汁。 
(2)配制時,按每100 m1 10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續(xù)加熱融化,補(bǔ)足失水。 
    (3)分裝、加塞、包扎。 
    (4)高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。 
 (四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制 
1.培養(yǎng)基成分 
蔗糖                                             3g 
NaN03                                           0.3g 
K2HP04                                                                0.1g 
KCl                                             0.05g 
MgSO4·7H2O                                     0.05 g 
FeS04                                                                     0.001 g 
瓊脂                                           1.5-2g 
蒸餾水                                         100ml 
自然pH                                                  
2.配制方法 
 (1)稱量及溶化  量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。 
(2)定容  候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。 
(3)加瓊脂  加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。 
(4)分裝、加塞、包扎。 
(5)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。 
五、實驗報告內(nèi)容 
記錄你所配制培養(yǎng)基的名稱及成分。

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