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知識(shí)分享:如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
?、?將血清從低溫冰箱取出后,先于2~8℃冰箱放置12-24小時(shí)左右使之部分溶解,然后在室溫下使之全溶;但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
?、?切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來(lái)的血清直接放在水浴中,無(wú)論室溫的水或者37℃的水;因?yàn)樵谒≈醒逖杆偃诨?,過(guò)大的溫差變化(-20℃→37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清析出沉淀。
?、?血清應(yīng)該置于-15℃以下保存;若一次無(wú)法用完一瓶,應(yīng)該無(wú)菌分裝,再冷凍保存,避免反復(fù)凍融。
血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?
?、?纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到1-2mm,可以用肉眼觀察到。
?、?磷酸鈣,它也是常見(jiàn)的一種沉淀物,通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn),這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng),因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。
③ 膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì),它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。關(guān)于細(xì)胞生長(zhǎng),我們的試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng),我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點(diǎn)。
血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400-600g離心5min,上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。 我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,一方面它可能會(huì)阻塞您的過(guò)濾膜;另一方面,過(guò)濾血清這種行為可能會(huì)導(dǎo)致血清中部分營(yíng)養(yǎng)成分的流失。
如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久、搖晃不均勻等,都會(huì)造成沉淀增多;我們建議,如非必要,無(wú)須對(duì)血清進(jìn)行滅活;若必須熱滅活,應(yīng)嚴(yán)格遵守56℃、30min 的原則,并隨時(shí)搖晃均勻。
注:以上資料僅供參考,不同品牌產(chǎn)品可能存在設(shè)計(jì)差異,操作前建議參考說(shuō)明書?。
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