在化學(xué)、生物、材料與醫(yī)藥研究領(lǐng)域，分子熒光光譜儀作為揭示物質(zhì)微觀發(fā)光特性的探針，通過(guò)激發(fā)樣品產(chǎn)生熒光，測(cè)定其發(fā)射光譜、激發(fā)光譜、熒光強(qiáng)度及壽命等參數(shù)，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)構(gòu)象分析、DNA檢測(cè)、熒光探針開(kāi)發(fā)與環(huán)境污染物識(shí)別。分子熒光光譜儀高靈敏度（可達(dá)ppb級(jí)）與選擇性，使其成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室的選擇。為確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、儀器穩(wěn)定，必須遵循科學(xué)、規(guī)范的操作流程。
第一步：環(huán)境準(zhǔn)備與儀器預(yù)熱
確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔、避光、溫度穩(wěn)定（20-25℃），避免強(qiáng)振動(dòng)與電磁干擾。開(kāi)啟儀器電源，依次啟動(dòng)光源（氙燈或激光器）、主機(jī)與冷卻系統(tǒng)（如需）。預(yù)熱30分鐘，使光源輸出穩(wěn)定、探測(cè)器溫度恒定，避免基線漂移。
第二步：樣品制備與裝樣
根據(jù)測(cè)試需求配制適當(dāng)濃度的溶液樣品，避免濃度過(guò)高導(dǎo)致“自吸收”或“熒光猝滅”。使用潔凈的石英比色皿（玻璃對(duì)紫外光吸收強(qiáng)，不適用），注入液體至皿高的2/3-3/4。擦拭皿壁指紋與液滴，將比色皿標(biāo)記線對(duì)準(zhǔn)光路方向，輕放于樣品倉(cāng)，避免劃傷光學(xué)面。
第三步：參數(shù)設(shè)置與模式選擇
通過(guò)控制軟件設(shè)定測(cè)試模式：
發(fā)射光譜：固定激發(fā)波長(zhǎng)，掃描發(fā)射波長(zhǎng)范圍；
激發(fā)光譜：固定發(fā)射波長(zhǎng)，掃描激發(fā)波長(zhǎng)；
定量分析：設(shè)定固定激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)，測(cè)量熒光強(qiáng)度。
設(shè)置狹縫寬度（影響分辨率與靈敏度）、積分時(shí)間、掃描速度等參數(shù)，平衡信噪比與測(cè)試效率。
第四步：背景校正與基線掃描
先放入空白溶劑（如去離子水、乙醇）比色皿，執(zhí)行“背景扣除”或“基線校正”，消除溶劑拉曼散射與儀器本底信號(hào)。此步驟對(duì)低熒光強(qiáng)度樣品尤為關(guān)鍵。
第五步：樣品測(cè)量與數(shù)據(jù)采集
更換為待測(cè)樣品，啟動(dòng)掃描。觀察實(shí)時(shí)光譜曲線，確認(rèn)無(wú)異常峰或噪聲。對(duì)關(guān)鍵樣品可進(jìn)行重復(fù)掃描，驗(yàn)證重現(xiàn)性。若進(jìn)行熒光壽命測(cè)量，需切換至?xí)r間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)（TCSPC）模式，使用脈沖光源與高速探測(cè)器。
第六步：數(shù)據(jù)保存與儀器復(fù)位
測(cè)試完成后，及時(shí)保存數(shù)據(jù)至指定路徑，導(dǎo)出為通用格式（如.csv、.txt）。取出樣品，用溶劑清洗比色皿并晾干。關(guān)閉光源（尤其氙燈，避免頻繁開(kāi)關(guān)）、主機(jī)與軟件。長(zhǎng)期不用時(shí)，覆蓋防塵罩。
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