色譜進(jìn)樣瓶是用于盛放待測樣品溶液,并放入自動進(jìn)樣器中進(jìn)行進(jìn)樣的容器。它的選擇和使用直接影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性和可靠性。
一、主要組成部分
一個完整的色譜進(jìn)樣瓶通常由以下幾部分組成:
瓶體:通常為透明的玻璃小瓶,也有塑料材質(zhì)。
瓶蓋:一般為鋁制或塑料材質(zhì),用于密封瓶口。
隔墊:安裝在瓶蓋內(nèi)部,是一個由特殊材料(如硅橡膠/PTFE)制成的彈性墊片。進(jìn)樣針通過穿刺隔墊來抽取樣品。
二、關(guān)鍵特性與選擇要點
1. 材質(zhì)
玻璃材質(zhì):
標(biāo)準(zhǔn)棕色玻璃:常用。棕色可有效阻擋紫外線,保護對光敏感的樣品免受降解。絕大多數(shù)分析推薦使用棕色瓶。
透明玻璃:適用于對光不敏感的樣品,方便觀察樣品液位和是否有氣泡。
琥珀色玻璃:比棕色玻璃的避光性能更強,用于高光敏感性的樣品。
Duran玻璃/硼硅酸鹽玻璃:具有優(yōu)異的化學(xué)惰性和耐熱性,是高質(zhì)量分析的選擇。
塑料材質(zhì)(如PP聚丙烯):
優(yōu)點:成本低,不易碎,一次性使用避免交叉污染。
缺點:可能對有機溶劑兼容性差(發(fā)生溶脹或溶解),吸附性可能比玻璃強,不適用于所有樣品和溶劑。通常用于非關(guān)鍵性分析或水相樣品。
2. 規(guī)格/容量
常見的總?cè)萘?瓶體大小)有:
2 mL:常用的規(guī)格,適用于絕大多數(shù)HPLC和GC自動進(jìn)樣器。
1.5 mL:類似于微量離心管(EP管)的容量,也很常見。
1 mL, 0.3 mL, 0.15 mL (微量內(nèi)插管):用于樣品量非常珍貴的情況,如生命科學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)研究。
內(nèi)插管是一種放在標(biāo)準(zhǔn)2mL進(jìn)樣瓶內(nèi)的更小的塑料或玻璃管,其容積很小(如100-250µL),可以有效減少樣品殘留和蒸發(fā),特別適合小體積樣品。
工作容量(實際可裝入的樣品體積)通常為總?cè)萘康囊话胱笥遥?mL瓶推薦裝入不超過1mL樣品,以保證瓶頂有足夠的氣體空間(“氣液比”),避免產(chǎn)生負(fù)壓影響進(jìn)樣針準(zhǔn)確取樣。
3. 瓶口規(guī)格
國際標(biāo)準(zhǔn):9 mm 和 13 mm。
9 mm 是絕對的主流,絕大多數(shù)現(xiàn)代的自動進(jìn)樣器都適配9mm瓶蓋的進(jìn)樣瓶。在選擇時,瓶蓋、隔墊和瓶體必須是相同規(guī)格的。
4. 隔墊
隔墊是防止樣品蒸發(fā)和污染的關(guān)鍵。
材質(zhì):常見的有硅橡膠/PTFE(聚四氟乙烯)復(fù)合隔墊。PTFE面朝內(nèi)接觸樣品,因其化學(xué)惰性強,能有效防止樣品吸附和隔墊雜質(zhì)溶出;橡膠面朝外提供彈性和密封性,便于針穿刺。
特性:
預(yù)切割隔墊:隔墊上已有十字形或一字形的預(yù)切割縫,可以極大減少進(jìn)樣針穿刺時的阻力(保護進(jìn)樣針)和產(chǎn)生的碎屑。
可穿刺次數(shù):高質(zhì)量的隔墊可耐受多次穿刺(如10-20次)而不漏氣。但建議每個樣品瓶的隔墊穿刺不要超過10次,否則密封性下降,可能導(dǎo)致樣品揮發(fā)、交叉污染或引入氣泡。
5. 瓶蓋
材質(zhì):多為鋁制,帶有密封圈,可以通過自動進(jìn)樣器的壓蓋裝置進(jìn)行壓緊(Crimp) 或 卡扣(Snap)。
壓蓋:使用專用壓蓋器將鋁蓋緊緊包裹在瓶口螺紋上,密封性好,是可靠的方式。
卡扣蓋:無需工具,手動按下即可密封,方便快捷,但密封性稍遜于壓蓋,適用于揮發(fā)性不強的樣品。
三、使用注意事項與最佳實踐
清洗與重復(fù)使用:
玻璃瓶可以清洗后重復(fù)使用,但必須清洗(如先用溶劑超聲,再用純凈水超聲,最后烘干),否則會造成嚴(yán)重的交叉污染和鬼峰。
對于關(guān)鍵實驗、痕量分析或不同樣品類型,強烈建議使用全新的一次性進(jìn)樣瓶,這是保證數(shù)據(jù)安全的方式。
裝樣體積:
切勿過滿!通常裝入樣品體積不超過瓶子總?cè)萘康囊话?如2mL瓶裝1mL樣品)。這保證了足夠的頂部空間,避免進(jìn)樣針取樣時因瓶內(nèi)負(fù)壓而取液不準(zhǔn),或產(chǎn)生氣泡。
隔墊穿刺次數(shù):
限制穿刺次數(shù)。多次穿刺會產(chǎn)生隔墊碎屑(可能堵塞色譜柱或進(jìn)樣針),并降低密封性,導(dǎo)致樣品揮發(fā)。建議在瓶蓋上標(biāo)記穿刺次數(shù),超過10次務(wù)必更換隔墊或整個瓶子。
兼容性:
確保進(jìn)樣瓶、隔墊的材質(zhì)與你的樣品/溶劑兼容。例如,PTFE對幾乎所有溶劑都是惰性的,但某些塑料瓶可能不耐強有機溶劑。
瓶蓋的松緊:
使用壓蓋瓶時,要確保壓緊到位,密封良好。使用卡扣蓋時,要聽到“咔噠”聲確??劬o。
注意:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴(yán)格遵循說明,避免交叉污染,并確保樣本處理(如離心、稀釋)符合要求?。
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