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本生解析競爭法在ELISA中的兩種計算方法
競爭法ELISA的兩種主要計算方法如下,結(jié)合實(shí)驗規(guī)范與數(shù)據(jù)分析要點(diǎn):
一、陽性判定值法?
計算步驟?
先計算陰性對照(NCX)和陽性對照(PCX)的平均吸光度(A值),要求(NCX-PCX)差值≥0.300(如抗HBc檢測試劑盒)?。
陰性對照A值需滿足:≥0.5×NCX且≤1.5×NCX,超出范圍需剔除或重測?。
陽性判定值公式:
判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
若樣本A值≤判定值,判為陽性;反之陰性?。
適用場景?
需嚴(yán)格驗證實(shí)驗有效性(如抗HBc檢測)?。
二、抑制率法?
計算步驟?
抑制率公式:抑制率(%)= 陰性對照A值?樣本A值
陰性對照A值?樣本A值 ×100%
通常以抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性?。
優(yōu)勢與局限?
適用于小分子抗原(如激素、藥物)的快速篩查?。
需確保陰性對照A值在1.0-1.5之間以保證靈敏度?。
三、方法對比?
方法? ?適用對象? ?關(guān)鍵指標(biāo)?
陽性判定值法 抗體/大分子抗原 需驗證(NCX-PCX)差值有效性
抑制率法 小分子抗原(如藥物) 抑制率≥50%為陽性
注:實(shí)驗前需校準(zhǔn)儀器,并設(shè)置空白對照(Blank)和最大結(jié)合對照(B0)以排除干擾?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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