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ELISA常見(jiàn)類型的分類及原理特點(diǎn)
以下是ELISA常見(jiàn)類型的分類及原理特點(diǎn),本生結(jié)合高可信度來(lái)源整理:
一、ELISA四大核心類型?
直接ELISA?
原理?:抗原直接包被于固相載體,酶標(biāo)一抗直接檢測(cè)抗原?。
特點(diǎn)?:步驟簡(jiǎn)單(無(wú)需二抗),但靈敏度較低(信號(hào)未放大),背景較高?。
應(yīng)用?:病毒顆粒檢測(cè)(如HPV)、純化蛋白定量?。
間接ELISA?
原理?:抗原包被后,先加一抗,再用酶標(biāo)二抗檢測(cè)一抗?。
特點(diǎn)?:信號(hào)放大5-10倍,靈敏度高;但可能因二抗交叉反應(yīng)增加背景?。
應(yīng)用?:HIV抗體篩查、自身免疫病檢測(cè)(如ANA)?。
夾心ELISA?
原理?:雙抗體夾心結(jié)構(gòu)(捕獲抗體+檢測(cè)抗體),形成“三明治”復(fù)合物?。
特點(diǎn)?:靈敏度高(pg/mL級(jí)),需抗原具雙表位(大分子蛋白)?。
應(yīng)用?:細(xì)胞因子(IL-6)、腫瘤標(biāo)志物(CEA)檢測(cè)?。
競(jìng)爭(zhēng)ELISA?
原理?:樣本抗原與標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限抗體,信號(hào)強(qiáng)度與樣本濃度成反比?。
特點(diǎn)?:適用于小分子(如激素、藥物),但靈敏度較低?。
應(yīng)用?:皮質(zhì)醇檢測(cè)、農(nóng)藥殘留分析?。
二、類型對(duì)比與選擇建議?
類型? ?靈敏度? ?適用分子? ?優(yōu)勢(shì)? ?局限性?
直接ELISA 低 大分子抗原 操作快速,無(wú)交叉反應(yīng) 背景高,需標(biāo)記多種一抗
間接ELISA 高 抗體/抗原 信號(hào)放大,經(jīng)濟(jì)靈活 步驟多,可能交叉反應(yīng)
夾心ELISA 多表位大分子 高特異性,適合復(fù)雜樣本 需雙抗體,成本較高
競(jìng)爭(zhēng)ELISA 中 小分子 可檢測(cè)不純樣品,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性好 靈敏度低,顯色與濃度負(fù)相關(guān)
三、視頻演示?
四、衍生類型與特殊設(shè)計(jì)?
雙抗原夾心法?:用于抗體檢測(cè)(如hCG妊娠檢測(cè))?。
FastScan™ ELISA?:基于溶液的夾心法,縮短檢測(cè)時(shí)間?。
選擇時(shí)需根據(jù)目標(biāo)分子大小、樣本復(fù)雜度及靈敏度需求綜合判斷?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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