倒置培養(yǎng)皿的注意事項有哪些?
培養(yǎng)基凝固后再倒置
需等待瓊脂凝固(約30分鐘),避免未凝固時倒置導致培養(yǎng)基變形或與皿底分離。
若培養(yǎng)基未凝固即倒置,可能因重力作用導致厚度不均或邊緣開裂。
保持水平放置
倒置后需確保培養(yǎng)皿水平放置,防止培養(yǎng)基接觸皿蓋影響菌落生長或冷凝水滴落污染。
控制冷凝水量
若冷凝水過多(如傾注溫度過高導致),需在無菌條件下吹干表面水分,避免菌落蔓延或計數(shù)誤差。
傾注平板計數(shù)時,可覆蓋一層薄瓊脂以減少冷凝水影響。
操作規(guī)范
倒置后單手取放培養(yǎng)皿,避免頻繁開蓋污染。
厭氧培養(yǎng)等特殊場景需正置并密封,倒置會破壞厭氧環(huán)境。
培養(yǎng)基傾注量優(yōu)化
常規(guī)培養(yǎng)(≤48小時):18-20ml瓊脂(90mm培養(yǎng)皿)。
長期培養(yǎng)或高溫條件(>40℃):增至25ml,防止水分蒸發(fā)過快導致干裂。
常見問題與解決方案
氣泡處理:緩慢傾倒培養(yǎng)基,將氣泡留在容器底部;若平板內殘留氣泡,可輕搖使氣泡移至邊緣。
溫度控制:傾注時培養(yǎng)基溫度需45℃(手背感覺燙但不燙手),過高易產(chǎn)生冷凝水,過低易凝固不均。
注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 ELISA試劑盒
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