近年來，隨著細(xì)胞免疫治療的迅速發(fā)展，出現(xiàn)了Car-T以外的一些免疫治療法，比如腫瘤浸潤療法TIL，γδ T細(xì)胞免疫療法，這些癌癥治療方法引起了廣泛的關(guān)注。

TIL（Tumor Infiltrating Lymphocytes）療法，即腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞療法，其大致流程是：從腫瘤患者體內(nèi)分離免疫活性細(xì)胞，在體外進(jìn)行擴(kuò)增和功能鑒定，然后向患者回輸，絕大多數(shù)TIL能夠靶向多種腫瘤抗原（每份回輸TIL平均1.4萬個(gè)TCR），克服了腫瘤異質(zhì)性的問題。TIL特異性識(shí)別腫瘤抗原，不識(shí)別正常組織，因此有著極其出眾的安全性。    

γδ T細(xì)胞是一類獨(dú)特的T細(xì)胞，它們不僅具有傳統(tǒng)αβ T細(xì)胞的免疫功能，還能識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞，無需依賴主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子的呈遞，這使它們?cè)谀[瘤免疫逃逸中表現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

清輝聯(lián)諾近日宣布，其自主研發(fā)的靶向B7H3的異體通用型CAR-γδ T細(xì)胞注射液QH104A，已獲得美國FDA臨床試驗(yàn)（IND）批準(zhǔn)，并正式進(jìn)入中國藥品監(jiān)管局CDE受理程序。這一創(chuàng)新療法的目標(biāo)是為復(fù)發(fā)或進(jìn)展性高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者帶來全新的治療希望。

無論是TIL還是γδ T細(xì)胞療法，它們的研究和應(yīng)用面臨著諸多挑戰(zhàn)，其中之一便是細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的精準(zhǔn)檢測(cè)，都需要解決細(xì)胞量的問題：通過優(yōu)化摸索細(xì)胞因子（IL2,IL15,IL21等），在幾周內(nèi)擴(kuò)增出數(shù)百億甚至上千億的細(xì)胞，很大化地提高擴(kuò)增效率。

“一刀切”的細(xì)胞因子配方可能無法在所有情況下都獲得很好的效果。不同的細(xì)胞因子組合的濃度和比例可能產(chǎn)生1+1>2的協(xié)同效應(yīng)（如IL-2+IL-15），也可能相互制約。同時(shí)，同一細(xì)胞因子在不同濃度或不同培養(yǎng)階段可能發(fā)揮不同作用，所以添加時(shí)機(jī)也很重要（例如IL-21）。

在這些細(xì)胞培養(yǎng)工藝優(yōu)化過程中，每天要面臨幾十甚至上百個(gè)細(xì)胞樣品的繁重的計(jì)數(shù)工作，所以一款高通量的自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀就顯得尤為重要。艾貝泰提供全自動(dòng)高通量細(xì)胞計(jì)數(shù)儀Countleader FL 2000，采用AOPI雙熒光法，17min可以計(jì)數(shù)24個(gè)樣品，幫助精確判斷T細(xì)胞的數(shù)量和活性，助力免疫細(xì)胞治療的生產(chǎn)工藝體系優(yōu)化。每個(gè)樣品成本僅為進(jìn)口設(shè)備的1/4，實(shí)現(xiàn)真正意義上的降本增效。

1. 適用預(yù)包埋AO/PI染料的24通高通量耗材：微流體通道耗材，每孔僅需添加40μL細(xì)胞樣品，無需手動(dòng)染色，減少手動(dòng)操作帶來的誤差，提高細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性！17min可獲得24個(gè)樣品結(jié)果，加速探索、優(yōu)化生產(chǎn)工藝體系過程。

2. 內(nèi)置針對(duì)免疫細(xì)胞的小細(xì)胞分析方法，精確分割免疫細(xì)胞；耗材內(nèi)置AO/PI雙熒光染料，自動(dòng)染色免疫細(xì)胞，不受紅細(xì)胞、血小板，磁珠、試劑等的干擾，不受人工誤差影響。    

部分視野放大圖：A.AO/PI雙熒光圖片；B.明場(chǎng)圖片；C.算法識(shí)別圖

此外，Countleader FL 2000還能提供GFP/RFP 轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞周期（PI）、細(xì)胞凋亡（AnnexinV-PI）等更多分析功能。例如，引入特定基因，以增強(qiáng)T細(xì)胞靶向殺傷能力、降低免疫排斥或提升體內(nèi)存活時(shí)間等，當(dāng)與熒光蛋白（如 GFP、RFP）共表達(dá)時(shí)，F(xiàn)L 2000可快速檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。  

GFP 轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)部分視野示意圖：1. 明場(chǎng)圖片（總細(xì)胞）；2. 綠色熒光圖片（陽性細(xì)胞）    

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