HPLC法測定胃寧沖劑中丹參素的含量

來源： 2007年02月03日 15:11

胃寧沖劑系由丹參、黨參等12味中藥用水煎煮提取濃縮制粒而成。成份復(fù)雜，而丹參是其主藥，主要活性成份為丹參素。本文采用HPLC法對丹參素的含量進行測定，以期能有效地控制胃寧沖劑的質(zhì)量。
1　儀器與設(shè)備
1.1　美國Waters液相色譜儀；Waters486紫外檢測器；DL-800色譜工作站。
1.2　丹參素鈉對照品（上海醫(yī)科大學(xué)）；甲醇、醋酸均為分析純。
1.3　胃寧沖劑樣品（江蘇蘇中制藥廠，批號：970527，970528，970529）。
2　色譜分析條件
　　色譜柱Waters C18（3.9× 150mm）;流動相：甲醇-0.4%醋酸溶液（5∶95）;檢測波長:281nm;柱溫:室溫；流速：1.2ml/mi n;按該條件測定樣品中的丹參素與其它相關(guān)成分能達到基線分離，理論板數(shù)為11600,，分離度為4.1。經(jīng)多次實驗，當(dāng)理論板數(shù)為8000時，丹參素仍能較好分離，規(guī)定理論板數(shù)應(yīng)不少于8000。對照品及樣品色譜圖見圖1。
3　方法及結(jié)果
3.1 　對照品丹參素鈉的純度測定：取丹參素鈉對照品約6mg,置100ml量瓶中加水至刻度，搖勻，依上述條件進樣100μl,采樣時間為1h,以峰面積歸一化法計算，丹參素鈉的含量為99.61% 。

圖1　對照品色譜圖　　　　　　　樣品色譜圖
a-丹參素

3.2　對照品溶液的制備：取丹參素鈉對照品（約相當(dāng)于丹參素10mg）, 精密稱定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。
3.3　標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密吸取對照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0和1.2ml置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。依上述條件取10μl注入色譜儀，記錄色譜圖，以對照品濃度為橫坐標(biāo)，對照品峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=2.45X+1.163,r=0.9994。丹參素濃度在20～120μg/ml范圍內(nèi)峰面積積分值與濃度呈良好的線性關(guān)系。
3.4　樣品的測定：取樣品約0.5g,精密稱定，置50ml量瓶中，加水適量，超聲處理30min,取出，放冷至室溫，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按上述條件取供試品溶液10μl進行分析，結(jié)果見表1。

表1　胃寧沖劑中丹參素的含量（n=3 ）

批　號
含量（%）
RSD （%）

970527
0.232
0.83

970528
0.218
0.68

970529
0.281
1.24

3.5　穩(wěn)定性試驗：取樣品依本法進行處理后，每間隔1h測定一次含量，結(jié)果表明樣品中丹參素含量在24h內(nèi)幾乎沒有變化。
3.6　重現(xiàn)性試驗：取同一批號樣品5份，分別依本法處理進行測定，結(jié)果見表2。

表2　重現(xiàn)性試驗結(jié)果

編　號
含量（%）
平均含量（%）
RSD（ %）

1
0.231

2
0.223

3
0.226
0.225
1.59

4
0.222

5
0.224

3.7　回收率試驗：精密稱取已知含量的樣品適量，精密加入一定量的丹參素對照品，依本法進行含量測定并計算回收率，結(jié)果見表3。

表3　回收率試驗結(jié)果（n=6）

樣品中丹參
素含量（mg）
加入丹參
素量（mg）
測得丹參
素量（mg）
回收率
（%）
平均回收率（%）
RSD
（%）

0.626
　
1.116
　100.90

0.634
　
1.094
98.20

0.587
　
1.057
99.06

0.652
0.480
1.144
101.06
100.54
1.56

0.645
　
1.149
102.13

0.598
　
1.098
101.86

4　討　論
4.1　丹參為處方中主藥成份，其水溶性有效成份有丹參素，原兒茶醛，原兒茶酸等，據(jù)文獻報道［1］丹參素含量較高，故選擇測定丹參素含量，作為胃寧沖劑的含量指標(biāo)。丹參素的測定方法有紙層析紫外分光光度法［2］、薄層掃描法［3］和液相色譜法［4，5］等，大多測定的是藥材、單方制劑或兩味的復(fù)方制劑。胃寧沖劑成份復(fù)雜，有效成份分離比較困難，選用本法可同時達到分離測定的目的。
4.2　由于丹參素鈉對照品的水溶液不夠穩(wěn)定，為此，在測定過程中丹參素鈉對照品溶液應(yīng)臨用現(xiàn)配為好。

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