即酶聯(lián)免疫檢測儀,是酶戀免疫吸附實驗的儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。ELISA測定一般要求測試液的zui終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同.圖示是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,zui后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果.微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單.
微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
目前國內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目,如:乙肝五項、艾滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法,報出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,臨界值規(guī)定為:陰性對照品的OD值×2.5,通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進(jìn)行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
國內(nèi)多家機(jī)構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質(zhì)性的感染和病變(如:肝炎、艾滋病、優(yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。