愛爾蘭Megazyme膳食纖維總量檢測(cè)

      在生命科學(xué)領(lǐng)域，上海仁邦醫(yī)藥為業(yè)界提供了豐富的實(shí)驗(yàn)室和生物醫(yī)藥生產(chǎn)研發(fā)的產(chǎn)品。慶祝上海仁邦醫(yī)藥正式成為膳食纖維總量檢測(cè)試劑盒 Total Dietary Fibre Assay Kit的 代理商，在這里要感謝廣大客戶多年來(lái)對(duì)上海仁邦醫(yī)藥科技有限公司的支持和厚愛，我們將一如既往的為廣大客戶帶來(lái)膳食纖維總量檢測(cè)試劑盒 Total Dietary Fibre Assay Kit高品質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)，歡迎廣大新老客戶。
 

膳食纖維總量檢測(cè)試劑盒 Total Dietary Fibre Assay Kit
規(guī)格：200 assays per kit
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
      膳食纖維是一種多糖，它既不能被消化吸收，也不能產(chǎn)生能量。因此，曾一度被認(rèn)為是一種“無(wú)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)”。后來(lái)發(fā)現(xiàn)了膳食纖維具有相當(dāng)重要的作用。并被營(yíng)養(yǎng)學(xué)界補(bǔ)充認(rèn)定為第七類營(yíng)養(yǎng)素，和傳統(tǒng)的六類營(yíng)養(yǎng)素——蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、維生素、礦物質(zhì)與水并列。

1.可溶性膳食纖維（來(lái)源于果膠、藻膠、魔芋等。魔芋盛產(chǎn)于我國(guó)四川等地，主要成分為葡甘聚糖）

2.不可溶性膳食纖維（全谷類糧食，其中包括麥麩、麥片、全麥粉及糙米、燕麥全谷類食物、豆類、蔬菜和水果等。）

1. 簡(jiǎn)介：

膳食纖維是指碳水化合物及其相類似物質(zhì)的總和，包括多糖、寡糖、木質(zhì)素以及相關(guān)的植物物質(zhì)。主要有纖維素、半纖維素、果膠及親水膠體物質(zhì)，如樹膠、海藻多糖等組分；另外還包括植物細(xì)胞壁中所含有的木質(zhì)素；不被人體消化酶所分解的物質(zhì)，如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纖維素、黏質(zhì)、寡糖以及少量相關(guān)成分，如蠟紙、角質(zhì)、軟木脂等。

總膳食纖維檢測(cè)試劑盒是根據(jù)AOAC991.43，AOAC 985.29，AACC32-07和AACC 32-05方法開發(fā)的，也適用于其它方法，如AACC Method 32-21，AACC method32-06。

2. 檢測(cè)原理

脫脂（如大于10%）干燥后的樣品經(jīng)熱穩(wěn)定a-淀粉酶、蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶酶解消化，酶解液通過乙醇沉淀、過濾，乙醇和丙酮洗滌殘?jiān)蟾稍铩⒎Q重，得到總膳食纖維（TDF）殘?jiān)?/span>

酶解液通過直接過濾、熱水洗滌殘?jiān)?，干燥后稱重，得到不溶性膳食纖維（IDF）殘?jiān)?/span>

濾液用乙醇沉淀，過濾、干燥、稱重，得到可溶性膳食纖維（SDF）殘?jiān)?/span>

TDF、IDF和SDF的殘?jiān)鄢鞍踪|(zhì)、灰分和空白即得TDF、IDF和SDF含量。

該檢測(cè)試劑盒的主要優(yōu)勢(shì)在于直接提供高純度的酶，酶的活力是標(biāo)準(zhǔn)化的，而標(biāo)準(zhǔn)化的a-淀粉酶的活力在測(cè)量抗性淀粉是*的。

淀粉葡萄糖苷酶中基本沒有纖維素酶，而其他常用的酶制劑中常含有這種污染物，這將導(dǎo)致溶解和低估β-葡聚糖。

該試劑盒提供的酶都是穩(wěn)定的液體，可以保存到試劑盒有效期，并且是直接應(yīng)用液，不需要使用前再溶解。

3. 用途

適用于檢測(cè)谷物、水果、蔬菜和加工食品中的總膳食纖維（TDF）、不溶性

膳食纖維（IDF）和可溶性膳食纖維（SDF）的檢測(cè)。

4. 提供試劑及材料

每一個(gè)盒中的提供的酶試劑足夠進(jìn)行200個(gè)試驗(yàn)，如另外需要可單獨(dú)訂貨：

Bottle 1 ，1瓶：

熱穩(wěn)定a-淀粉酶（20mL，~ 3,000 U/mL，Ceralpha method；~ 10,000 U/mL on

soluble starch。).

Bottle 2，1瓶：

純化的蛋白酶(20mL，50 mg/mL; ~ 350 tyrosine Units/mL。)

Bottle 3，2瓶:

淀粉葡萄糖苷酶(20mL，3300 U/mL on soluble starch。)

總計(jì)：80ml（4瓶20ml包裝）

另外，實(shí)驗(yàn)中需要用到硅藻土需要單獨(dú)購(gòu)買。

其他相關(guān)試劑盒：

膳食纖維質(zhì)控試劑盒（貨號(hào)：K-TSCK）

質(zhì)控試劑盒用于檢驗(yàn)酶的效力和純度，含下表中所列物質(zhì)每種一瓶，并附有技術(shù)數(shù)據(jù)單(K-TSCK)，盒中每種物質(zhì)足夠10次測(cè)試用。

5. 需要的設(shè)備和試劑

5.1 設(shè)備

1. 高型無(wú)導(dǎo)流口燒杯：400mL或600mL
2. 坩堝：具粗面燒結(jié)玻璃板，孔徑40-60 μm。清洗后在馬福爐中525℃灰化6小時(shí)或過夜，用真空泵除去硅藻土和灰分，室溫下用2%清洗液浸泡1小時(shí)，用水和蒸餾水沖洗干凈，用15 mL丙酮沖洗后風(fēng)干，加1g硅藻土到干燥的坩堝中，在130℃干燥至恒重，在干燥器中冷卻1小時(shí)，記下坩堝（包括硅藻土）的重量。
3. 真空溶劑過濾裝置：真空泵或有調(diào)節(jié)裝置的抽吸器，1L的抽濾瓶，側(cè)壁有抽濾口，以及抽濾瓶配套的橡膠塞。用于酶解液的抽濾。
4. 恒溫振蕩水浴：95-100℃
5. 分析天平：感量0.1mg
6. 天平（臺(tái)秤）：4 000g量程，感量0.1g
7. 馬福爐：525±5°C，
8. 烘箱：103±2℃，130±3℃
9. 真空干燥箱
10. 干燥器：二氧化硅或等同干燥劑
11. PH計(jì)，具有溫度補(bǔ)償功能。
12. 微量凱氏定氮儀。
13. 移液器，50-200 μL，5 mL，一次性移液吸頭。
14. 計(jì)時(shí)器。
15. 橡膠刮勺
16. 磁力攪拌器

5.2 試劑

1. 95%乙醇（體積比），
2. 78 %乙醇：取821mL95%乙醇置于容量瓶中，用水稀釋到刻度，混勻。
3. 丙酮
4. 蒸餾水或去離子水
5. 清洗液Micro (International Products Corp.,Trenton,NJ).，配成2%液體
6. MES/TRIS緩沖液（0.05mol/L）:稱取19.52g (MES) (Sigma, M 8250)和14.2 g

(TRIS) (Sigma,T1503)，用1.7L蒸餾水溶解，用6mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH至

8.2±0.1，加水稀釋到2L（注意24℃時(shí)PH值為8.2，20℃時(shí)PH值為8.3，27-28℃

時(shí)PH值為8.1）

1. 鹽酸溶液（0.561 mol/L）：取93.5mL 6 mol/L的鹽酸，加入700mL水中，混勻

后用水定容到1L。

1. 氫氧化鈉
2. PH值標(biāo)準(zhǔn)緩沖液：PH值為 4.0，7.0 和10.0。

6. 酶的純化和標(biāo)準(zhǔn)化

6.1 根據(jù)AACC/AOAC的膳食纖維檢測(cè)方法，必須確保酶的純度。

6.1.1 淀粉葡萄糖苷酶被木聚糖酶、纖維素酶和果膠酶污染，會(huì)低估β-葡聚糖、

阿拉伯木聚糖和果膠的含量。

6.1.2 熱穩(wěn)定a-淀粉酶被污染，會(huì)影響抗性淀粉的測(cè)量。

6.1.3 蛋白酶被4-β-葡聚糖酶污染，會(huì)低估β-葡聚糖的含量。

6.1.4 如不是使用該酶，請(qǐng)參考下面方法測(cè)定。

注解：

『1』：沒有酶活力作用。

『2』：zui大酶活力作用

『3』：除很少量的柑橘果膠全部沉淀

『4』：含有大量抗性淀粉，準(zhǔn)確回收率的數(shù)值影響熱穩(wěn)定a-淀粉酶的使用量。

6.2 根據(jù)AACC/AOAC的膳食纖維檢測(cè)方法，必須對(duì)酶標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)定，如果不是使用該的酶，請(qǐng)按以下方法測(cè)定

6.2.1 淀粉葡萄糖苷酶，0.2 mL，

— 酶活力表示方法1：淀粉/葡萄糖酶-過氧化物酶法，3300 U/mL，1個(gè)酶活力單位定義為：40°C，PH值4.5時(shí)，每分鐘釋放1 μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：對(duì)-硝基苯基-b-麥芽糖苷（PNPBM)法，200 U/mL， 1個(gè)酶活力單位（1PNP單位））定義為：40°C，有過量萄糖苷酶存在下，每分鐘從對(duì)硝基苯基-β-麥芽糖苷釋放1 μmol 對(duì)硝基苯基所需要的酶量。

6.2.2 熱穩(wěn)定a-淀粉酶，0.05 mL，

— 酶活力表示方法1：以淀粉為底物，以Nelson/Somogyi還原糖表示，10000U/mL ，1個(gè)酶活力單位定義為：40°C，PH值6.5時(shí)，每分鐘釋放1 μmol葡萄糖所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：對(duì)硝基苯基麥芽糖為底物，3,000 U/mL（Ceralpha），1個(gè)酶活力單位定義為：40°C，PH值6.5時(shí)，每分鐘釋放1 μmol對(duì)-硝基苯基所需要的酶量。

6.2.3 蛋白酶，0.10 mL

— 酶活力表示方法1：酪蛋白測(cè)試，350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine U/mL，1個(gè)酶活力單位定義為：40°C，PH值8.0時(shí)，每分鐘從可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯）1 μmol酪氨酸所需要的酶量。

— 酶活力表示方法2：偶氮酪蛋白測(cè)試，350 U/mL或50 mg/mL或7 Tyrosine U/mL，1個(gè)內(nèi)肽酶活力單位定義為：40°C，PH值8.0時(shí)，每分鐘從可溶性酪蛋白中水解出（并溶于三氯）1μmol酪氨酸所需要的酶量。該偶氮酪蛋白(貨號(hào)：S-AZCAS).

7. 檢測(cè)步驟

7.1 試樣制備

準(zhǔn)確稱取雙份試樣各1 g，質(zhì)量差小于0.005g，到0.1mg，置于400mL或600mL高型燒杯中，同時(shí)制備雙份空白樣，在每個(gè)燒杯中加入40 mL PH值8.2的MES-TRIS緩沖液，磁力攪拌，直到試樣*分散到緩沖液中。

7.2 熱穩(wěn)定a-淀粉酶酶解：加入50 μL熱穩(wěn)定a-淀粉酶溶液，加蓋鋁箔，置于95-100°C恒溫振蕩水浴中持續(xù)振搖，當(dāng)所有燒杯全部放入水浴開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)35分鐘。

7.3 冷卻：將燒杯取出玲卻到60°C，除去鋁箔蓋，用刮勺將燒杯內(nèi)壁和底部的膠狀物刮下，用10 mL蒸餾水沖洗燒杯壁和刮勺。

7.4 蛋白酶酶解：在每個(gè)燒杯中各加入100 μL蛋白酶溶液，加蓋鋁箔，置于60°C恒振蕩水浴中，當(dāng)燒杯內(nèi)溫度達(dá)到60°C開始計(jì)時(shí)，持續(xù)反應(yīng)30分鐘。

7.5 PH值調(diào)節(jié)：反應(yīng)30分鐘后，邊攪拌邊加入0.561 mol/L鹽酸，嚴(yán)格控制60°C，用 1mol/L氫氧化鈉溶液或 1mol/L鹽酸溶液，控制PH值在4.5±0.2。

7.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解：在上述溶液中邊攪拌邊加入200 μL淀粉葡萄糖苷酶溶液，加蓋鋁箔，置于60°C恒溫振蕩水浴中，持續(xù)振搖，當(dāng)燒杯內(nèi)溫度達(dá)到60°C開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)30分鐘。

8. 測(cè)定

8.1 不溶性膳食纖維測(cè)定：

8.1.1 過濾洗滌：試樣酶解液全部轉(zhuǎn)移到坩堝中過濾，殘?jiān)?0mL預(yù)熱到70°C的蒸餾水洗滌兩次，合并過濾液，轉(zhuǎn)移至另一600mL高腳燒杯中，備測(cè)可溶性膳食纖維。殘?jiān)謩e用10mL 95%乙醇和丙酮洗滌兩次，抽濾去除洗滌液，將坩堝連同殘?jiān)?03°C烘干過夜，將坩堝置于干燥器中冷卻1小時(shí)，稱重（包括坩堝、膳食纖維殘?jiān)凸柙逋粒?，?.1mg，減去坩堝和硅藻土的干重，計(jì)算殘?jiān)|(zhì)量。

8.1.2 蛋白質(zhì)和灰分測(cè)定：稱完質(zhì)量的殘?jiān)凸柙逋恋幕旌衔?，一份用凱氏定氮法，以N×6.25為換算系數(shù)，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量。另一份在525°C灰化5小時(shí)，于干燥器中冷卻，稱量坩堝總量（至0.1mg）減去坩堝和硅藻土干重，計(jì)算灰分質(zhì)量。

8.2 可溶性膳食纖維測(cè)定

8.2.1 計(jì)算濾液體積：將不可溶性膳食纖維過濾后的濾液收集到600mL的高型燒杯中，通過燒杯+濾液總重扣除燒杯質(zhì)量的方法估算濾液的體積。

8.2.2 沉淀：將濾液加入4倍體積預(yù)熱60°C的95%乙醇，或取80g濾液加入320mL預(yù)熱60°C的95%乙醇室溫下沉淀1小時(shí)。

8.2.3 過濾：在干燥的坩堝中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，記錄坩堝的質(zhì)量（到0.1mg）。用15mL 78%乙醇將硅藻土潤(rùn)濕，并用真空溶劑過濾裝置在抽真空條件下，使硅藻土平鋪于坩堝中。將樣品酶解液緩慢轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)的坩堝中，抽濾。用刮勺和78%乙醇將所有殘?jiān)D(zhuǎn)至坩堝中。

8.2.4 洗滌：分別用15mL 78%乙醇、15mL 95%乙醇和15mL丙酮洗滌殘?jiān)鲀纱?，抽濾去除洗滌液后，將坩堝連同殘?jiān)?05°C烘干過夜。將坩堝置于干燥器中冷卻1小時(shí)，稱重（包括坩堝、膳食纖維殘?jiān)凸柙逋粒?，?.1mg。減去坩堝和硅藻土的干重，計(jì)算殘?jiān)|(zhì)量。

8.2.5 蛋白質(zhì)和灰分測(cè)定：稱完質(zhì)量的殘?jiān)凸柙逋恋幕旌衔?，一份用凱氏定氮法，以N×6.25為換算系數(shù)，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量，另一份在525°C灰化5小時(shí)，于干燥器中冷卻，稱量坩堝總量（至0.1mg）減去坩堝和硅藻土干重，計(jì)算灰分質(zhì)量。

8.3 總膳食纖維檢測(cè)檢測(cè)

8.3.1 沉淀：在每份試樣中加入預(yù)熱至60°C的95%乙醇225mL（預(yù)熱后的體積，如乙醇的溫度超過65°C，則加入228mL），乙醇與樣液體積比為4：1，取出燒杯，蓋上鋁箔，室溫下沉淀1小時(shí)。建議改為：稱量酶解液的質(zhì)量，用天平加入4倍質(zhì)量的預(yù)熱的60°C的95%乙醇，4°C冰箱中沉淀過夜。

8.3.2 過濾：在干燥的坩堝中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，記錄坩堝的質(zhì)量（到0.1mg）。用15mL 78%乙醇將硅藻土潤(rùn)濕，并用真空溶劑過濾裝置在抽真空條件下，使硅藻土平鋪于坩堝中。將樣品酶解液緩慢轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)的坩堝中，抽濾。用刮勺和78%乙醇將所有殘?jiān)D(zhuǎn)至坩堝中。

8.3.3 洗滌：分別用15mL 78%乙醇、15mL 95%乙醇和15mL丙酮洗滌殘?jiān)鲀纱?，抽濾去除洗滌液后，將坩堝連同殘?jiān)?05°C烘干過夜。將坩堝置于干燥器中冷卻1小時(shí)，稱重（包括坩堝、膳食纖維殘?jiān)凸柙逋粒?，?.1mg。減去坩堝和硅藻土的干重，計(jì)算殘?jiān)|(zhì)量。

8.3.4 蛋白質(zhì)和灰分測(cè)定：稱完質(zhì)量的殘?jiān)凸柙逋恋幕旌衔?，一份用凱氏定氮

法，以N×6.25為換算系數(shù)，計(jì)算蛋白質(zhì)質(zhì)量。，另一份在525°C灰化5小時(shí)，

于干燥器中冷卻，稱量坩堝總量（至0.1mg）減去坩堝和硅藻土

干重，計(jì)算灰分質(zhì)量。

9. 計(jì)算：

DF（%）=『（R1+R2）/2-p-A-B』/『（M1+M2）/2』*100%

式中：

DF=樣品中膳食纖維含量（TDF、IDF、SDF），%

R1 和R2=雙份樣品殘?jiān)馁|(zhì)量，單位為毫克（mg）

m1 和m2=雙份樣品的質(zhì)量，單位為毫克（mg）

A=灰分的質(zhì)量，

P=蛋白的質(zhì)量

B=空白=(BR1+BR2）/2-BP-BA

BR1 和BR2=雙份試樣空白殘?jiān)馁|(zhì)量

BP=試樣空白蛋白的質(zhì)量

BA=試樣空白灰分的質(zhì)量

可以使用該的計(jì)算軟件Mega-CalcTM進(jìn)行自動(dòng)計(jì)算。

方法二

根據(jù)AACC method 32-05 和AOAC Method 985.29方法測(cè)定

1. 儀器設(shè)備和同方法一
2. 試劑和溶液
3. 280±2.0 mL 95 %乙醇

b．10±0.5 mL 78 %乙醇

1. 50±0.5 mL緩沖液
2. 磷酸鹽緩沖液（0.08mol/L，PH值6.0）: 取1.400g Na2HPO4和9.68g NaH2PO4

溶解在700mL蒸餾水中，用水定容到1L，用PH計(jì)檢查PH值。

1. 氫氧化鈉溶液（0.275mol/L）：去11g氫氧化鈉溶解在700mL蒸餾水中，冷卻轉(zhuǎn)

移到容量瓶中，用水定容到1L。

1. 鹽酸溶液（0.325 mol/L）：取 325 mL 1.0 mol/L 鹽酸置于容量瓶中，用水定容

到1L。

3. 樣品準(zhǔn)備

總膳食纖維的測(cè)定必須是低脂或無(wú)脂的干燥樣品，取混勻后的樣品于70°C真

空干燥過夜，干燥器中冷卻，再稱重記錄重量損失，干樣粉碎后過0.3-0.5 mm

篩，若試樣不能加熱，則冷凍干燥后再粉碎過篩。如果是高脂肪樣品(> 10 %)，

取經(jīng)過干燥的樣品分別用25mL石油醚脫脂三次，干燥后記錄脫脂的質(zhì)量損失，

zui后計(jì)算總膳食纖維含量時(shí)進(jìn)行進(jìn)行校正，粉碎過篩后的干燥試樣放在干燥

器中待用。

4. 分析步驟

準(zhǔn)確稱取雙份試樣各1 g，質(zhì)量差小于0.005g，到0.1mg，置于400mL或

600mL高型燒杯中，同時(shí)制備雙份空白樣，在每個(gè)燒杯中加入50 mL PH值6.0

的磷酸鹽緩沖液，磁力攪拌，直到試樣*分散到緩沖液中，控制PH值6.0±0.1。

4.2 熱穩(wěn)定a-淀粉酶酶解：加入50 μL熱穩(wěn)定a-淀粉酶溶液，加蓋鋁箔，置于沸騰

水浴中15分鐘，每5分鐘輕輕振蕩一次。當(dāng)燒杯內(nèi)的溫度到100°C開始計(jì)時(shí)，

總共大約30分鐘。

4.3 冷卻：將燒杯取出冷卻到室溫，加入10 mL 0.275mol/L 的氫氧化鈉，調(diào)節(jié)

PH值在7.5±0.1。

4.4 蛋白酶酶解：在每個(gè)燒杯中各加入100 μL蛋白酶溶液，加蓋鋁箔，置于60°C

恒振蕩水浴中，當(dāng)燒杯溫度達(dá)到60°C開始計(jì)時(shí)，持續(xù)反應(yīng)30分鐘。

4.5 冷卻：加入10 mL 0.325 mol/L鹽酸，調(diào)節(jié)PH值在4.5±0.2。

4.6 淀粉葡萄糖苷酶酶解：在上述溶液中邊攪拌邊加入200 μL淀粉葡萄糖苷酶溶

液，加蓋鋁箔，置于60°C恒溫振蕩水浴中，持續(xù)振搖，當(dāng)燒杯內(nèi)溫度達(dá)到60°C

開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)20分鐘。

4.7 在每份試樣中加入預(yù)熱至60°C的95%乙醇280mL（預(yù)熱前的體積），乙醇與樣

液體積比為4：1，取出燒杯，蓋上鋁箔，室溫下沉淀1小時(shí)。

4.8 過濾：在干燥的坩堝中加入1g硅藻土，70°C真空干燥至恒重，記錄坩堝的質(zhì)

量（到0.1mg）。用15mL 78%乙醇將硅藻土潤(rùn)濕，并用真空溶劑過濾裝置

在抽真空條件下，使硅藻土平鋪于坩堝中。將樣品酶解液緩慢轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)的

坩堝中，抽濾。用刮勺和78%乙醇將所有殘?jiān)D(zhuǎn)至坩堝中。

4.9 洗滌：分別用20mL 78%乙醇洗滌3次、10mL 95%乙醇和10mL丙酮洗滌殘?jiān)?/span>

各兩次，抽濾去除洗滌液后，將坩堝連同殘?jiān)?05°C烘干過夜或70°C真空

干燥過夜。將坩堝置于干燥器中冷卻1小時(shí)，稱重（包括坩堝、膳食纖維殘?jiān)?/span>

和硅藻土），至0.1mg。減去坩堝和硅藻土的干重，計(jì)算殘?jiān)|(zhì)量。

4.10 蛋白質(zhì)和灰分測(cè)定：稱完質(zhì)量的殘?jiān)凸柙逋恋幕旌衔?，一份用凱氏定

氮法，以N×6.25為換算系數(shù)，計(jì)算蛋白質(zhì)含量。另一份在525°C灰化5小時(shí)，

于干燥器中冷卻，稱量坩堝總量（至0.1mg）減去坩堝和硅藻土干重，

計(jì)算灰分質(zhì)量。

計(jì)算：

未校正的平均空白殘?jiān)?(UABR)=平均試樣空白殘?jiān)|(zhì)量，單位為毫克

未校正空白蛋白殘?jiān)?BPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正空白灰分殘?jiān)?BAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的空白(CB)= UABR – BPR – BAR

未校正的平均樣品殘?jiān)?(USAR)=平均試樣空白殘?jiān)|(zhì)量，單位為毫克

未校正樣品蛋白殘?jiān)?SPR)=UABR x %空白蛋白/100

未校正樣品灰分殘?jiān)?SAR)=UABR x %空白灰分/100

校正的樣品(CSR)= USAR-SPR-SAR-CB% TDF= 100 x CSR/樣品質(zhì)量mgzui終的% TDF是去除了和水分后的總膳食纖維含量。

10、參考文獻(xiàn)：

1. Association of Official Analytical Chemists (1985). Official Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43,A20, p.399.
2. Association of Official Analytical Chemists (1986). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69:370.
3. Association of Official Analytical Chemists (1987). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70:393.
4. Prosky, L., Asp, N.-G., Furda, I., DeVries, J.W., Schweizer, T.F.and Harland, B.F. (1985). Determination of total dietary fibre in foods and food products: Collaborative study. J. Assoc. Off. Anal.Chem., 68:677.
5. Prosky, L., Asp, N.-G., Schweizer, T.F., DeVries, J.W. and Furda,I. (1988).Determination of insoluble, soluble, and total dietary fibre in

foods and food products. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 71:1017.16

Total Dietary Fiber Assay Kit

The Total Dietary Fiber test kit is suitable is suitable for the measurement and analysis of Total Dietary Fiber.

For the determination of Total Dietary Fiber in cereal products,
foodstuffs, feeds and other materialsPrinciple:
(α-amylase + amyloglucosidase)
(1) Starch + H₂O → D-glucose(protease)
(2) Protein + H₂O → peptides(3) Dietary fiber determined gravimetrically following alcohol
precipitation

(4) Ash and residual protein determined on DF residues
and subtracted

Kit size: 100 / 200 assays
Method: Hydrolysis / removal of non-dietary
fibre components
Total assay time: ~ 100 min
Detection limit: 0.5-100% of sample weight
Application examples: 
Food ingredients, food products and other materials
Method recognition: 
AOAC (Methods 985.29, 991.42, 991.43 and 993.19), AACC
(Methods 32-05.01, 32-06.01, 32-07.01 and 32-21.01) and
CODEX (Type I Method)

Total Dietary Fiber Assay Kit, for the measurement and analysis of total, soluble and insoluble dietary fiber according to AOAC and AACC approved methods. See General Referee Reports: Journal of AOAC INTERNATIONAL, Vol. 81, No. 1, 1998.
Fiber is a mixture of complex organic substances, including hydrophilic compounds, such as soluble and insoluble polysaccharides and non-digestable oligosaccharides, as well as a range of non-swellable, more or less hydrophobic, compounds such as cutins, suberins and lignins. The procedures for the determination and analysis of total dietary fiber as outlined in our booklet are based on the methods of Lee et al.¹ and Prosky et al.^2,3 (AOAC 991.43, AOAC 985.29, AACC 32-07.01 and AACC 32-05.01). However, the enzymes in the Megazyme Total Dietary Fiber Kit can also be used in other dietary fiber analytical methods such as AACC Method 32-21.01 and AACC Method 32-06.01.
1. Association of Official Analytical Chemists. (1985). Official Methods of Analysis, 14th ed., 1st suppl. Secs. 43, A14-43, A20, p.399.
2. Association of Official Analytical Chemists. (1986). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 69, 370.
3. Association of Official Analytical Chemists. (1987). Changes in methods. J. Assoc. Off. Anal. Chem., 70, 393.
Two separate methods are described in the associated data booklet:
METHOD 1:
DETERMINATION OF TOTAL, SOLUBLE AND INSOLUBLE DIETARY FIBER
Based on AOAC Method 991.43 “Total, Soluble, and Insoluble Dietary Fiber in Foods” (First Action 1991) and AACC Method 32-07.01 “Determination of Soluble, Insoluble, and Total Dietary Fiber in Foods and Food Products” (Final Approval 10-16-91).
METHOD 2:
DETERMINATION OF TOTAL DIETARY FIBER
Based on AACC method 32-05.01 and AOAC Method 985.29.

Advantages

• Very competitive price (cost per test)
• All reagents stable for > 2 years
• High purity / standardised enzymes employed
• Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
• Simple format