以下是雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書綜合整理：

　　BS-7303 雞極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒

　　一、實(shí)驗(yàn)原理?

　　采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。通過預(yù)包被抗體的微孔板捕獲樣本中的VLDL，加入酶標(biāo)記檢測抗體后形成復(fù)合物，經(jīng)底物顯色(TMB顯藍(lán)色，酸化后轉(zhuǎn)黃色)，顏色深淺與VLDL濃度成正比。

　　二、試劑盒組成?

　　預(yù)包被板條?：96孔或48孔配置(含空白對照孔)

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：24ng/ml(需按說明書稀釋)

　　酶標(biāo)抗體?：HRP標(biāo)記的檢測抗體

　　底物(A/B液)?：TMB顯色液

　　終止液?：酸性溶液

　　洗滌液?：需稀釋的濃縮液

　　三、操作步驟?

　　樣本準(zhǔn)備?

　　血清/血漿樣本需離心去除顆粒物，建議1:1稀釋后使用。

　　標(biāo)準(zhǔn)品與樣本加樣?

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔：加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品50μL。

　　樣本孔：加入待測樣本50μL，空白孔不加。

　　孵育與洗滌?

　　加入酶標(biāo)抗體100μL，37℃孵育60分鐘。

　　洗滌5次(每孔加洗滌液350μL，靜置1分鐘后拍干)。

　　顯色與終止?

　　每孔加底物A/B各50μL，37℃避光孵育15分鐘。

　　加入終止液50μL，5秒內(nèi)搖勻。

　　檢測?

　　酶標(biāo)儀450nm波長測定OD值。

　　四、注意事項(xiàng)?

　　保存條件?：試劑盒2-8℃保存，頻繁使用時(shí)避免反復(fù)凍融。

　　交叉污染?：使用一次性吸頭，避免金屬部分接觸終止液/底物。

　　洗滌要求?：充分拍干微孔板，避免殘留液體影響結(jié)果。

　　數(shù)據(jù)有效性?：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸R值需≥0.9900，批內(nèi)變異系數(shù)<15%。

　　五、技術(shù)參數(shù)?

　　檢測范圍?：10–320 μmol/L(不同品牌可能差異)。

　　靈敏度?：檢測濃度<1.0 ng/L。

　　有效期?：6個(gè)月(2-8℃保存)。

　　注：以上僅供參考，如需具體品牌試劑盒的差異說明，可進(jìn)一步補(bǔ)充信息。

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