大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

　　BS-2969  大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

　　以下是天津本生關(guān)于大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明綜合指南：

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法，通過預(yù)包被抗體捕獲樣本中的IL-3，再與生物素標(biāo)記的檢測抗體及HRP標(biāo)記的親和素形成復(fù)合物，TMB顯色后測定OD值，濃度與吸光度成正比。

　　二、試劑盒組成

　　預(yù)包被96孔板

　　凍干標(biāo)準(zhǔn)品(需用1ml蒸餾水復(fù)溶)

　　生物素標(biāo)記抗體(100×濃縮)

　　HRP標(biāo)記親和素(100×濃縮)

　　洗滌緩沖液(25×濃縮)

　　TMB顯色液及終止液

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：采集后1000×g離心10分鐘，避免溶血或脂血

　　組織勻漿?：用生理鹽水勻漿后離心取上清

　　保存?：短期存于2-8℃(48小時內(nèi))，長期需分裝凍存于-70℃，避免反復(fù)凍融

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說明書梯度稀釋(示例：4000→2000→1000 pg/mL等比稀釋)

　　加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育120分鐘

　　洗滌?：用1×洗滌液洗板4-6次，拍干

　　加檢測抗體?：加入生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘

　　加酶結(jié)合物?：加入HRP標(biāo)記親和素，37℃孵育30分鐘

　　顯色?：加入TMB避光顯色15分鐘，終止后450nm讀數(shù)

　　五、注意事項(xiàng)

　　不同批次試劑不可混用，使用前所有組分需平衡至室溫

　　顯色時間需嚴(yán)格控制，終止后10分鐘內(nèi)完成讀數(shù)

　　避免底物接觸金屬器械，操作時需佩戴防護(hù)裝備

　　若樣本濃度超出范圍，需用稀釋液適當(dāng)稀釋后重測

　　六、數(shù)據(jù)計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過擬合方程計算樣本濃度。

　　注：以上資料僅供參考，如需更詳細(xì)參數(shù)(如檢測范圍、靈敏度等)，建議查閱試劑盒配套說明書或聯(lián)系供應(yīng)商獲取。

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