一、產(chǎn)品基本信息

　　BS-0245人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒

　　檢測原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法：

　　預(yù)包被單克隆抗體捕獲樣本中SAM抗原

　　生物素標(biāo)記多克隆抗體作為檢測抗體

　　TMB顯色系統(tǒng)(450nm測定)實現(xiàn)定量分析

　　試劑盒組成

　　組分規(guī)格/說明

　　預(yù)包被微孔板96孔/板(可拆卸)

　　SAM標(biāo)準(zhǔn)品0-1000pg/ml梯度濃度

　　生物素標(biāo)記抗體100×濃縮液

　　HRP-親和素結(jié)合物100×濃縮液

　　TMB底物液避光保存

　　終止液2Mliusuan溶液

　　二、實驗操作流程

　　樣本預(yù)處理

　　血清/血漿：EDTA抗凝，1000×g離心15分鐘

　　細(xì)胞上清：去除沉淀后-70℃分裝保存

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

　　步驟參數(shù)

　　稀釋標(biāo)準(zhǔn)品按1:3梯度稀釋(建議7個濃度點)

　　加樣量每孔100μl

　　孵育條件37℃ 60分鐘

　　檢測步驟

　　1. 加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素抗體→HRP結(jié)合物 2. 洗滌：PBST緩沖液洗板5次(每次浸泡30秒) 3. 顯色：TMB避光反應(yīng)15分鐘→終止液終止

　　三、質(zhì)量控制要求

　　指標(biāo)可接受標(biāo)準(zhǔn)

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線R2值≥0.990

　　板內(nèi)CV≤10%

　　板間CV≤15%

　　回收率85-115%

　　四、注意事項

　　關(guān)鍵操作

　　避免反復(fù)凍融標(biāo)準(zhǔn)品(建議分裝儲存)

　　顯色時間需精確控制(±30秒誤差)

　　安全警示

　　終止液具有強(qiáng)腐蝕性(需佩戴護(hù)目鏡)

　　廢液需用10%NaOH中和后處理

　　數(shù)據(jù)判讀

　　建議使用四參數(shù)擬合算法(4PL)

　　溶血/脂血樣本需備注說明

　　注：以上資料僅供參考，具體請咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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