資料簡介
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒實驗原理
BS-3416大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒采用?雙抗體夾心法?(Sandwich ELISA)檢測樣本中的gp130濃度,其核心原理是通過特異性抗體的雙重識別實現(xiàn)抗原的捕獲與信號放大,最終通過顯色反應定量分析?。
1. ?固相抗體包被?
將抗gp130的捕獲抗體(通常為多克隆抗體)預包被于微孔板表面,形成固相載體?。
2. ?抗原結合與洗滌?
樣本或標準品中的gp130與固相抗體特異性結合,洗滌去除未結合物質,減少背景干擾?。
3. ?酶標抗體結合?
加入生物素化的檢測抗體(通常為單克隆抗體),與gp130的另一表位結合,形成“抗體-抗原-酶標抗體"夾心復合物?。
4. ?信號放大與顯色?
生物素-親和素系統(tǒng)?:部分試劑盒引入鏈霉親和素-過氧化物酶(SABC)復合物,與生物素化的檢測抗體結合,進一步放大信號?。
酶催化顯色?:加入底物(如TMB),辣根過氧化物酶(HRP)催化TMB顯藍色,終止液(如硫酸)終止反應后變黃色,顯色強度與gp130濃度成正比?。
5. ?定量分析?
通過酶標儀在450 nm波長測定吸光度(OD值),繪制標準曲線計算樣本中gp130濃度?。
技術特點與優(yōu)化
高特異性?:雙抗體識別不同表位,避免交叉反應?。
靈敏度高?:檢測范圍通常為3.12–200 ng/mL或更低(如pg/mL級)?。
樣本兼容性?:適用于血清、血漿、組織勻漿等?。
常見問題與解決方案
高背景?:優(yōu)化封閉步驟(如使用BSA)或增加洗滌次數(shù)?。
顯色異常?:檢查底物孵育時間或酶標抗體活性?。
應用場景
gp130作為IL-6家族細胞因子的共同信號受體,其檢測在免疫調控、炎癥研究及腫瘤標志物分析中具有重要價值?。
注:以上資料供參考,不作為實驗依據(jù),如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。
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