【中國制藥網(wǎng) 技術(shù)文章】制藥、乳制品、酒類等發(fā)酵過程是一個無菌、無污染的過程，發(fā)酵罐是一種對物料進行機械攪拌與發(fā)酵的設(shè)備，其采用了無菌系統(tǒng)，避免和防止了空氣中微生物的污染，大大延長了產(chǎn)品的保質(zhì)期和產(chǎn)品的純正。但是發(fā)酵罐在使用的過程中，經(jīng)常會出現(xiàn)染菌現(xiàn)象，那么發(fā)酵罐染菌的途徑有哪些?不同染菌原因?qū)Πl(fā)酵會帶來什么樣的影響?雜菌污染的挽救及處理方法又有哪些? 江蘇弗盧德流體設(shè)備有限公司作為發(fā)酵設(shè)備行業(yè)的，擁有豐富的發(fā)酵罐產(chǎn)品經(jīng)驗。在本文中，弗盧德流體設(shè)備相關(guān)工作人員便為大家綜合分析了發(fā)酵罐染菌現(xiàn)象。

 

江蘇弗盧德流體設(shè)備有限公司10L智能發(fā)酵罐

　　據(jù)該工作人員表示，菌種培養(yǎng)過程操作不當(dāng);培養(yǎng)基滅菌不徹底;發(fā)酵設(shè)備(如發(fā)酵罐、管道)密封不嚴(yán);空氣除菌不凈均可造成發(fā)酵罐染菌。而不同發(fā)酵過程相對危害大的雜菌種類有谷氨酸的發(fā)酵，噬菌體;檸檬酸的發(fā)酵，青霉菌;青霉素的發(fā)酵，細(xì)短產(chǎn)氣桿菌;鏈霉素的發(fā)酵，細(xì)短桿菌、假單孢桿菌;四環(huán)素的發(fā)酵，雙球菌、芽孢桿菌、莢膜桿菌。

　　不同生產(chǎn)階段染菌對發(fā)酵的影響也不一樣。其中在種子培養(yǎng)期染菌，這對整個發(fā)酵過程的危害極大。若在發(fā)酵前期染菌，那么生產(chǎn)菌的生長繁殖會遭到嚴(yán)重干擾。而在發(fā)酵中期染菌，這會干擾生產(chǎn)菌的代謝，影響產(chǎn)物的生成。不同生產(chǎn)階段染菌對發(fā)酵的影響會不一樣，但是不管是在種子培養(yǎng)期還是在發(fā)酵前期或是中期，發(fā)酵都會受到很大的影響，唯有發(fā)酵后期染菌，影響相對較小，但同樣具有一定的影響。

　　另外，不同染菌原因?qū)Πl(fā)酵的影響也有所不同。如空氣帶菌，會使發(fā)酵大面積染菌。設(shè)備滲漏，這使得染菌幾率較大。而種子帶菌將導(dǎo)致染菌范圍不斷擴大，使生產(chǎn)蒙受重大損失。培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不徹底，這一般不具延續(xù)性，但會使單個(批)發(fā)酵罐發(fā)酵失敗。因此在發(fā)酵過程中，大家要謹(jǐn)防發(fā)酵罐染菌。而發(fā)酵染菌后，大家一定要找出染菌的原因，以總結(jié)防治發(fā)酵染菌的經(jīng)驗教訓(xùn)，積極采取必要措施，把雜菌消滅在發(fā)生之前。

　　發(fā)酵異?，F(xiàn)象及染菌原因分析

　　根據(jù)該工作人表示，發(fā)酵異?，F(xiàn)象有以下三點：

　　(1)溶解氧的異常變化：當(dāng)雜菌是好氣性微生物時，溶解氧的變化是在較短時間內(nèi)下降，直至接近于零，且在長時間內(nèi)不能回升;當(dāng)雜菌是非好氣性微生物，而生產(chǎn)菌由于受污染而抑制生長，使耗氧量減少，溶解氧 升高。

　　(2)排氣的CO2異常變化：如雜菌污染時，糖耗加快， CO2含量含量增加，噬菌體污染后，糖耗減慢，CO2含量減少。因此，可根據(jù)CO2含量的異常變化判斷染菌。

　　(3)其它異?，F(xiàn)象：如菌體生長不良、pH值的異常變化、發(fā)酵過程中泡沫的異常增多、發(fā)酵液的顏色異常變化、代謝產(chǎn)物含量的異常下跌、發(fā)酵周期的異常拖長、發(fā)酵液的粘度異常增加等判斷染菌。

　　染菌原因主要有以下四點：

　　(1)從染菌的規(guī)模來分析染菌原因

　　大批發(fā)酵罐染菌主要是因為空氣系統(tǒng)。部分發(fā)酵罐(或罐組)染菌，前期可能是種子帶雜菌，或滅菌不徹底，中后期則可能是中間補料系統(tǒng)或油管路系統(tǒng)發(fā)生問題造成的。個別發(fā)酵罐連續(xù)染菌是設(shè)備問題(如閥門的滲漏或罐體腐蝕磨損)。設(shè)備的腐蝕磨損所引起的染菌會出現(xiàn)每批發(fā)酵的染菌時間向前推移的現(xiàn)象。個別發(fā)酵罐偶然染菌原因比較復(fù)雜，因為各種染菌途徑都可能引起。

　　(2)從染菌的類型來分析

　　耐熱性芽孢桿菌死角或滅菌不徹底。球菌、酵母可能是從蒸汽的冷凝水或空氣中帶來的。淺綠色菌落(革蘭氏陰性桿菌) ，是因為發(fā)酵罐的冷卻管或夾套滲漏。霉菌或是滅菌不徹底或無菌操作不嚴(yán)格。

　　(3)從染菌的時間來分析

　　發(fā)酵早期染菌、種子帶菌、培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底、設(shè)備或管道有死角，中后期染菌、中間補料、設(shè)備滲漏、操作不合理。

　　(4)空氣過濾系統(tǒng)方面原因

　　空氣過濾系統(tǒng)方面染菌主要是在進風(fēng)口、生產(chǎn)環(huán)境、空氣過濾器?？諝膺^濾系統(tǒng)帶菌會使發(fā)酵罐批批染菌、罐罐染菌，此時要對空氣過濾系統(tǒng)進行無菌樣檢測。

　　雜菌污染的挽救及處理

　　發(fā)酵罐染菌的檢查和判斷方法有無菌試驗方法、顯微鏡檢查法(鏡檢法)、肉湯培養(yǎng)法、平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法。那么雜菌污染又有哪些挽救及處理方式?

　　(1)種子培養(yǎng)期染菌：應(yīng)經(jīng)滅菌后棄之，并對種子罐、管道等進行仔細(xì)檢查和徹底滅菌。

　　(2)發(fā)酵前期染菌：營養(yǎng)成分消耗不多，應(yīng)迅速重新滅菌;另處，補充必要的營養(yǎng)成分， 重新接種進行發(fā)酵。

　　(3)發(fā)酵中、后期染菌：可以加入適當(dāng)?shù)臍⒕鷦┗蚩股匾约罢５陌l(fā)酵液，以抑制雜菌的生長速度。產(chǎn)品的含量若達一定值，只要明確是染菌也可放罐。

　　(4)發(fā)酵后對設(shè)備的處理：空罐加熱滅菌后至120℃以上、30min后，才能使用。

　　也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡12h以上等方法進行處理。

　　微生物發(fā)酵的裝置，發(fā)酵罐廣泛應(yīng)用于乳制品、飲料、生物工程、制藥、精細(xì)化工等行業(yè)。但是發(fā)酵罐在發(fā)酵過程中，染菌現(xiàn)象是不可避免的，因此企業(yè)在生產(chǎn)過程中需要不斷提高生產(chǎn)技術(shù)水平，強化生產(chǎn)過程的管理，把握好各個易染菌的環(huán)節(jié)，盡可能的防止發(fā)酵染菌現(xiàn)象的發(fā)生。如果發(fā)生染菌，企業(yè)需要盡快找出其污染的原因，并采取相應(yīng)的有效措施，把發(fā)酵染菌造成的損失降低到低。安全、簡潔、精密、可靠、耐用是弗盧德流體設(shè)備制造產(chǎn)品的原則。其研發(fā)生產(chǎn)的產(chǎn)品在每一個細(xì)節(jié)都體現(xiàn)著處處為客戶著想的原則，設(shè)備零部件盡量采用標(biāo)準(zhǔn)件，關(guān)鍵配件基本與歐洲產(chǎn)品一致，以保證產(chǎn)品的質(zhì)量，同時優(yōu)化管路，方便運行中的維護、保養(yǎng)，降低客戶的使用成本。